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diaomou

新虫 (小有名气)

[求助] 感受态细胞制备,菌体离心沉淀不紧 已有2人参与

用SOB培养基18度培养DH5α,哪怕4000rpm,25分钟离心,菌体沉淀都不紧,倒上清时候会把绝大部分沉淀倒掉。
已经确定与离心机无关,与用离心杯还是50毫升离心管无关。
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博克侬浮码

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-08-09 16:44:52
转速提高试试,之前用过8000r/min
2楼2016-08-09 11:25:01
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diaomou

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 博克侬浮码 at 2016-08-09 11:25:01
转速提高试试,之前用过8000r/min

5000rpm,5min也不行。
担心转速太高,影响感受态细胞活性。
估计是SOB密度高,浮力大的原因?因为之前用LB做感受态没遇到这种情况
3楼2016-08-09 11:37:06
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
菌可能污染了,最好重新换靠谱的种子菌。
4楼2016-08-11 09:12:42
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swgcpy

至尊木虫 (著名写手)

同意楼上的,镜检一下是不是大肠吧
5楼2016-08-11 20:22:58
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diaomou

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by swgcpy at 2016-08-11 20:22:58
同意楼上的,镜检一下是不是大肠吧

应该不是污染了。
就是SOB培养基浮力大的原因。
换成LB培养基培养,就好了。
6楼2016-08-11 22:27:04
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安静de执着14

新虫 (著名写手)

4℃,5000rpm离心15分钟试试,问题应该不大。

发自小木虫Android客户端
7楼2016-08-11 22:57:18
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diaomou

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 安静de执着14 at 2016-08-11 22:57:18
4℃,5000rpm离心15分钟试试,问题应该不大。

谢谢,已经换成LB培养,正常了。
8楼2016-08-11 23:27:13
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Bioexperixgs

新虫 (正式写手)

本来研究就是不能沉淀太紧!能够和液体分开就行了。不然怎么会用4000rpm

发自小木虫Android客户端
9楼2016-08-13 07:49:38
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