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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 真核表达载体和宿主如何选择
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wenyi2015

银虫 (正式写手)

[求助] 真核表达载体和宿主如何选择 已有2人参与

如题 实验室有CHO 293 HELA细胞 想表达重组蛋白 该如何选择质粒载体 请各位给些建议

@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan @youlinglyw 发自小木虫IOS客户端
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1楼 2016-07-31 08:30:58
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科学球球

新虫 (正式写手)
同问

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2楼2016-07-31 08:37:38
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whb21
祝福

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3楼2016-08-01 07:15:21
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siriusxuan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-08-02 21:24:45
wenyi2015: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2016-08-05 08:11:58
CHO细胞一般用于工业大中规模生产，需要专用的震荡培养箱，条件需要摸索的比较多。
293细胞比较适合小量表达，做一些实验什么的比较合适，但对于载体上有Sv40 Ori元件的，用293T会更好，表达水平会更高，同样Cos-7细胞也是如此。
真核表达蛋白的话，一般都会加信号肽让蛋白分泌出去，invitrogen 有个psectag系列载体，我们用的就是。
也可以普通的质粒进行加蛋白标签过表达，然后进行纯化。
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wenyi2015
此座可言轻社稷，江山万里起风尘。
4楼2016-08-01 10:43:15
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wenyi2015

银虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by siriusxuan at 2016-08-01 10:43:15
CHO细胞一般用于工业大中规模生产，需要专用的震荡培养箱，条件需要摸索的比较多。
293细胞比较适合小量表达，做一些实验什么的比较合适，但对于载体上有Sv40 Ori元件的，用293T会更好，表达水平会更高，同样Cos-7 ...

好专业 非常感谢

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5楼2016-08-01 10:48:39
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wenyi2015: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-08-05 08:11:38
pcdna3.1 之类的 真核载体就行啊   
没有特殊要求的都好办
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wenyi2015
6楼2016-08-02 14:02:35
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wenyi2015

银虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by linyingjia at 2016-08-02 14:02:35
pcdna3.1 之类的 真核载体就行啊   
没有特殊要求的都好办

非常感谢

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7楼2016-08-02 15:45:24
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