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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » GST融合蛋白纯化时，样品制备问题
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

[求助] GST融合蛋白纯化时，样品制备问题 已有2人参与

超声频率和时间是多少呀？有没有具体的操作步骤？多谢

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1楼 2016-07-27 17:11:19
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
顶

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2楼2016-07-27 22:07:22
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水逝雁南飞

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
Lysis is complete when the cloudy cell suspension becomes translucent. The frequency and intensity of sonication should be adjusted such that complete lysis occurs in 10 seconds, without frothing (frothing may denature proteins)
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yuguiyan
3楼2016-07-27 23:04:17
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 水逝雁南飞 at 2016-07-27 23:04:17
Lysis is complete when the cloudy cell suspension becomes translucent. The frequency and intensity of sonication should be adjusted such that complete lysis occurs in 10 seconds, without frothing (fr ...

有中文没

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4楼2016-07-28 07:43:23
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个简单：
1.1:10重悬菌体，用缓冲液。
2：冰浴中，400W，20分钟就可以了
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5楼2016-07-29 09:54:24
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
5楼: Originally posted by hc-material at 2016-07-29 09:54:24
这个简单：
1.1:10重悬菌体，用缓冲液。
2：冰浴中，400W，20分钟就可以了

20分钟需要间隔吗？

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6楼2016-07-29 16:45:09
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cm14704019

至尊木虫 (知名作家)
我们科室一般是超声60次一次15下。注意在冰上哦

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7楼2016-07-30 10:39:20
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
7楼: Originally posted by cm14704019 at 2016-07-30 10:39:20
我们科室一般是超声60次一次15下。注意在冰上哦

一次15秒吗

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8楼2016-07-30 12:21:53
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
7楼: Originally posted by cm14704019 at 2016-07-30 10:39:20
我们科室一般是超声60次一次15下。注意在冰上哦

是每次超声15s
共超声60次吗？
间隔多久呢？

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9楼2016-07-30 14:19:47
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cm14704019

至尊木虫 (知名作家)
我用的是一次超1秒，停1秒。好几个样来回超的。不过这只适合扩培菌来提取蛋白超声使用，不知道你是通过什么提取的

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10楼2016-07-30 22:50:15
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