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皮蛋同学新虫 (小有名气)
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[求助]
小分子DNA的纯化问题（小于100bp），急！ 已有1人参与
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| 本人在做DNA的修饰转化，转化完成后有较多的有机溶剂（包括甘油等），现在需要对DNA进行纯化以进行后续实验，之前试过一个盒子，说明书是适合100-400bp的，回收效率特别低。我的DNA是合成引物，不是基因组的，长度只有50-60bp，公司说最多能合成85bp, 查了一下现在市面上大多是适合基因组DNA纯化的盒子，最少都要100bp。不知道各位大神有什么好的DNA纯化方法。（PAGE什么的就不用啦，对于我的实验来说不太可能用胶回收的方法纯化） |
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糖原随便加点，一般1微升／20微克，多点少点都没问题。乙酸钠用3M的储液，pH5.2，加1/9体积，也就是终浓度0.3M，如果本来的氯化钠浓度超过0.2M可以不加。乙醇加2.5倍体积(最少2倍体积)，零下20度放一个小时以上，最长过夜也可以。小离心机最高转速(大离心机15000转)离心半小时，可以看到小小的白色沉淀(有一种蓝色的糖原可以看到蓝色沉淀，更好)。去掉上清，加少许70%乙醇，振荡洗涤，再离心5分钟，去掉上清，开盖放置几分钟待乙醇挥发干，加水或者te溶解。其余细节请随便找一本分子克隆或者分子生物学实验教材或者百度之。 [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
10楼2016-07-28 09:25:26
2楼2016-07-25 11:12:44
皮蛋同学
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 958.3
- 散金: 2
- 帖子: 99
- 在线: 20.1小时
- 虫号: 4067985
- 注册: 2015-09-13
- 性别: MM
- 专业: 生化分析及生物传感
3楼2016-07-25 15:54:29
4楼2016-07-25 22:04:37
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