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804371539

铜虫 (小有名气)

[求助] PCR最近跑不出来! 已有1人参与

做荧光定量的预实验。提取的RNA反转录,大约有90ng的RNA反转录,RNA跑胶条带清楚。但是由于样本比较多,反转录操作比较慢。这是背景。用的引物以前做过预实验,不过当时的模板质量很好,浓度也大,PCR跑出来了,当时退火60度。如今用60度跑不出来,引物浓度做了稀释,10uM,1uM ,0.1uM ,0.25 uM ,0.1uM也跑不出来。引物的Tm 55左右。PCR 的体系是实验室公用的,不会有问题。求大神指点。
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2楼2016-08-01 09:53:05
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wangyou136

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我也遇到同样的问题了,你现在解决了吗?
3楼2016-08-04 10:59:34
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