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我是我2082木虫 (职业作家)
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[求助]
求助果蝇杂交
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| 有三个果蝇：分别是黄体W86果蝇（W86注射到yw果蝇，所在染色体未知）、Gal4在2号染色体的果蝇（P{w[+mC]=UAS-Dcr-2.D}1, w[1118]; P{w[+mC]=Act5C-GAL4}25FO1 / CyO, Cy）及dsRNA在2号染色体的红眼果蝇（dsRNA注射到y[1] v[1] P{y[+t7.7]=nos-phiC31\int.NLS}X; P{y[+t7.7]=CaryP}attP40果蝇）。怎么通过cross，把w86、Gal4及dsRNA弄到同一个果蝇里。？谢谢求果蝇杂交的大神出手帮忙。自己太笨，完全搞不懂。 |
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3楼2016-07-25 07:57:23
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我是我2082: 金币+50, 博学EPI+1, ★★★★★最佳答案, 谢谢 2016-07-25 17:30:44
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Gal4和dsRNA都在2号上，需要先做一个recombine。 Gal4 cross dsRNA，后代收不带CyO的virgin，然后Cross CyO/Sco的male，后代建single stock，收红眼、CyO的果蝇cross CyO/Sco，再下一代收Cyo、non-Sco的virgin和male自交，就变成可以传代的stock。 Gal4是lethal的吗？如果是，可以根据这个特点来筛选single stock。否则只能做PCR鉴定Gal4。 Gal4是红眼的吗？如果不是，那么这些single stock都带dsRNA。如果是，也只能做PCR鉴定dsRNA。 这两步鉴定完就可以拿到Gal4，dsRNA的果蝇。 然后W86和Gal4，dsRNA分别和double balancer cross，就可以把它们三个弄到一个果蝇里了。 |
4楼2016-07-25 15:31:29
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