应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台» 网络生活区» 有奖问答 » 有奖问答完结子版 » 求助果蝇杂交
91/1返回列表
查看: 3173  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 博学EPI ，点击这里进行查看

我是我2082

木虫 (职业作家)

[求助] 求助果蝇杂交

有三个果蝇：分别是黄体W86果蝇（W86注射到yw果蝇，所在染色体未知）、Gal4在2号染色体的果蝇（P{w[+mC]=UAS-Dcr-2.D}1, w[1118]; P{w[+mC]=Act5C-GAL4}25FO1 / CyO, Cy）及dsRNA在2号染色体的红眼果蝇（dsRNA注射到y[1] v[1] P{y[+t7.7]=nos-phiC31\int.NLS}X; P{y[+t7.7]=CaryP}attP40果蝇）。怎么通过cross，把w86、Gal4及dsRNA弄到同一个果蝇里。？谢谢求果蝇杂交的大神出手帮忙。自己太笨，完全搞不懂。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-07-21 18:44:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

lingn

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
我是我2082: 金币+50, 博学EPI+1, ★★★★★最佳答案, 谢谢 2016-07-25 17:30:44
Gal4和dsRNA都在2号上，需要先做一个recombine。
Gal4 cross dsRNA，后代收不带CyO的virgin，然后Cross CyO/Sco的male，后代建single stock，收红眼、CyO的果蝇cross CyO/Sco，再下一代收Cyo、non-Sco的virgin和male自交，就变成可以传代的stock。
Gal4是lethal的吗？如果是，可以根据这个特点来筛选single stock。否则只能做PCR鉴定Gal4。
Gal4是红眼的吗？如果不是，那么这些single stock都带dsRNA。如果是，也只能做PCR鉴定dsRNA。
这两步鉴定完就可以拿到Gal4，dsRNA的果蝇。

然后W86和Gal4，dsRNA分别和double balancer cross，就可以把它们三个弄到一个果蝇里了。
赞一下 回复此楼
4楼2016-07-25 15:31:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

lingn

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你需要做成一个可传代的果蝇吗？还是不需要传代？
先把W86和double balancer cross，确定它在哪个染色体上。最好是1号或者3号，如果是2号的话就麻烦了。
赞一下 回复此楼
2楼2016-07-22 17:52:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我是我2082

木虫 (职业作家)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lingn at 2016-07-22 17:52:59
你需要做成一个可传代的果蝇吗？还是不需要传代？
先把W86和double balancer cross，确定它在哪个染色体上。最好是1号或者3号，如果是2号的话就麻烦了。

需要的是可传代的。如果W86在1号或者3号染色体上，后续的cross如何进行？非常感谢。
赞一下 回复此楼
3楼2016-07-25 07:57:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我是我2082

木虫 (职业作家)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lingn at 2016-07-25 15:31:29
Gal4和dsRNA都在2号上，需要先做一个recombine。
Gal4 cross dsRNA，后代收不带CyO的virgin，然后Cross CyO/Sco的male，后代建single stock，收红眼、CyO的果蝇cross CyO/Sco，再下一代收Cyo、non-Sco的virgin和ma ...

Gal4上有 CyO, Cy，是不是意味着Gal4是lethal？

Gal4是红眼的。你说的做PCR鉴定dsRNA，是鉴定哪一步的果蝇？

能不能帮忙把整体杂交过程用cross scheme表示出来？谢谢
赞一下 回复此楼
5楼2016-07-25 17:22:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingn

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

Gal4所有的果蝇都带CyO的话，说明是lethal，如果有不带CyO 的，就不是lethal。
single stock变成可传代之后PCR鉴定。
赞一下 回复此楼
6楼2016-07-26 11:31:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingn

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
我是我2082: 金币+50, ★★★★★最佳答案, 谢谢 2016-07-28 07:48:44
cross scheme
求助果蝇杂交
未命名.JPG
赞一下 回复此楼
7楼2016-07-26 11:49:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我是我2082

木虫 (职业作家)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lingn at 2016-07-22 17:52:59
你需要做成一个可传代的果蝇吗？还是不需要传代？
先把W86和double balancer cross，确定它在哪个染色体上。最好是1号或者3号，如果是2号的话就麻烦了。

您好，能不能帮忙解决下W86在2号染色体的情况？非常感谢。
赞一下 回复此楼
8楼2016-07-26 13:40:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingn

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 我是我2082 at 2016-07-26 13:40:06
您好，能不能帮忙解决下W86在2号染色体的情况？非常感谢。...

W86在2号染色体的话，就很麻烦了。建议你先查一下Gal4和dsRNA在染色体上的位置。
如果它们俩挨得近的话，就按上面那样先做Gal4和dsRNA的recombine，然后再和W86做一下recombine。
赞一下 回复此楼
9楼2016-07-27 18:25:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 我是我2082 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:59 by CgyNCDVNhGVg
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-15 18:47 by CgyNCDVNhGVg
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 17:59 by CgyNCDVNhGVg
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:50 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +7 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:23 by CgyNCDVNhGVg
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 3/150 2026-09-15 15:50 by CgyNCDVNhGVg
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 3/150 2026-09-15 15:27 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-15 15:14 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 14:38 by VMDqgnlKimtZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-15 14:34 by VMDqgnlKimtZ
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-15 14:14 by VMDqgnlKimtZ
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:58 by C79jjtjAKjEn
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:34 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:50 by 5BDX0d0WFp7t
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-15 06:38 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:14 by 5BDX0d0WFp7t
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:01 by 5BDX0d0WFp7t
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
[基金申请] 求教各位大神：2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀？ +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
[找工作] 浙江师范大学是怎么坑我的 +6 recruit123 2026-09-09 6/300 2026-09-14 12:00 by 萨仁其其格
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭