应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台» 网络生活区» 有奖问答 » 有奖问答完结子版 » 求助果蝇杂交
91/1返回列表
查看: 3054  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 博学EPI ，点击这里进行查看

我是我2082

木虫 (职业作家)

[求助] 求助果蝇杂交

有三个果蝇：分别是黄体W86果蝇（W86注射到yw果蝇，所在染色体未知）、Gal4在2号染色体的果蝇（P{w[+mC]=UAS-Dcr-2.D}1, w[1118]; P{w[+mC]=Act5C-GAL4}25FO1 / CyO, Cy）及dsRNA在2号染色体的红眼果蝇（dsRNA注射到y[1] v[1] P{y[+t7.7]=nos-phiC31\int.NLS}X; P{y[+t7.7]=CaryP}attP40果蝇）。怎么通过cross，把w86、Gal4及dsRNA弄到同一个果蝇里。？谢谢求果蝇杂交的大神出手帮忙。自己太笨，完全搞不懂。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-07-21 18:44:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

lingn

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
我是我2082: 金币+50, 博学EPI+1, ★★★★★最佳答案, 谢谢 2016-07-25 17:30:44
Gal4和dsRNA都在2号上，需要先做一个recombine。
Gal4 cross dsRNA，后代收不带CyO的virgin，然后Cross CyO/Sco的male，后代建single stock，收红眼、CyO的果蝇cross CyO/Sco，再下一代收Cyo、non-Sco的virgin和male自交，就变成可以传代的stock。
Gal4是lethal的吗？如果是，可以根据这个特点来筛选single stock。否则只能做PCR鉴定Gal4。
Gal4是红眼的吗？如果不是，那么这些single stock都带dsRNA。如果是，也只能做PCR鉴定dsRNA。
这两步鉴定完就可以拿到Gal4，dsRNA的果蝇。

然后W86和Gal4，dsRNA分别和double balancer cross，就可以把它们三个弄到一个果蝇里了。
赞一下 回复此楼
4楼2016-07-25 15:31:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

lingn

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你需要做成一个可传代的果蝇吗？还是不需要传代？
先把W86和double balancer cross，确定它在哪个染色体上。最好是1号或者3号，如果是2号的话就麻烦了。
赞一下 回复此楼
2楼2016-07-22 17:52:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我是我2082

木虫 (职业作家)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lingn at 2016-07-22 17:52:59
你需要做成一个可传代的果蝇吗？还是不需要传代？
先把W86和double balancer cross，确定它在哪个染色体上。最好是1号或者3号，如果是2号的话就麻烦了。

需要的是可传代的。如果W86在1号或者3号染色体上，后续的cross如何进行？非常感谢。
赞一下 回复此楼
3楼2016-07-25 07:57:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我是我2082

木虫 (职业作家)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lingn at 2016-07-25 15:31:29
Gal4和dsRNA都在2号上，需要先做一个recombine。
Gal4 cross dsRNA，后代收不带CyO的virgin，然后Cross CyO/Sco的male，后代建single stock，收红眼、CyO的果蝇cross CyO/Sco，再下一代收Cyo、non-Sco的virgin和ma ...

Gal4上有 CyO, Cy，是不是意味着Gal4是lethal？

Gal4是红眼的。你说的做PCR鉴定dsRNA，是鉴定哪一步的果蝇？

能不能帮忙把整体杂交过程用cross scheme表示出来？谢谢
赞一下 回复此楼
5楼2016-07-25 17:22:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingn

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

Gal4所有的果蝇都带CyO的话，说明是lethal，如果有不带CyO 的，就不是lethal。
single stock变成可传代之后PCR鉴定。
赞一下 回复此楼
6楼2016-07-26 11:31:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingn

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
我是我2082: 金币+50, ★★★★★最佳答案, 谢谢 2016-07-28 07:48:44
cross scheme
求助果蝇杂交
未命名.JPG
赞一下 回复此楼
7楼2016-07-26 11:49:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我是我2082

木虫 (职业作家)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lingn at 2016-07-22 17:52:59
你需要做成一个可传代的果蝇吗？还是不需要传代？
先把W86和double balancer cross，确定它在哪个染色体上。最好是1号或者3号，如果是2号的话就麻烦了。

您好，能不能帮忙解决下W86在2号染色体的情况？非常感谢。
赞一下 回复此楼
8楼2016-07-26 13:40:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingn

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 我是我2082 at 2016-07-26 13:40:06
您好，能不能帮忙解决下W86在2号染色体的情况？非常感谢。...

W86在2号染色体的话，就很麻烦了。建议你先查一下Gal4和dsRNA在染色体上的位置。
如果它们俩挨得近的话，就按上面那样先做Gal4和dsRNA的recombine，然后再和W86做一下recombine。
赞一下 回复此楼
9楼2016-07-27 18:25:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 我是我2082 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] E0414, 我的本子有没有希望？ +7 布布和一二 2026-06-17 9/450 2026-06-21 19:29 by 布布和一二
[考研] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 9skg9htng1 2026-06-20 3/150 2026-06-21 19:18 by q1p9ixelzp
[教师之家] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 9skg9htng1 2026-06-20 3/150 2026-06-21 18:58 by q1p9ixelzp
[公派出国] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 9skg9htng1 2026-06-20 3/150 2026-06-21 18:00 by q1p9ixelzp
[考研] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 9skg9htng1 2026-06-20 4/200 2026-06-21 17:45 by q1p9ixelzp
[论文投稿] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 9skg9htng1 2026-06-20 3/150 2026-06-21 17:40 by q1p9ixelzp
[论文投稿] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 9skg9htng1 2026-06-20 3/150 2026-06-21 17:37 by q1p9ixelzp
[公派出国] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +4 vlfdw50o0u 2026-06-20 4/200 2026-06-21 17:25 by ky8v3skvft
[博后之家] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +4 vlfdw50o0u 2026-06-20 6/300 2026-06-21 17:05 by ky8v3skvft
[公派出国] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +4 vlfdw50o0u 2026-06-20 5/250 2026-06-21 17:00 by ky8v3skvft
[教师之家] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +5 vlfdw50o0u 2026-06-20 7/350 2026-06-21 16:57 by ky8v3skvft
[论文投稿] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 vlfdw50o0u 2026-06-20 5/250 2026-06-21 16:45 by ky8v3skvft
[教师之家] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +4 vlfdw50o0u 2026-06-20 7/350 2026-06-21 16:40 by ky8v3skvft
[论文投稿] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +4 vlfdw50o0u 2026-06-20 9/450 2026-06-21 16:37 by ky8v3skvft
[基金申请] 青A35岁以下通知答辩了吗 +3 暨阳一只柴 2026-06-17 3/150 2026-06-21 09:39 by kudofaye
[考博] 【全奖博士/科研助理/博后招生】新加坡南洋理工大学机械与航空航天学院 +3 robohaha 2026-06-15 4/200 2026-06-21 00:36 by lanbing1
[硕博家园] 一篇论文同时出现在两个期刊，一模一样，这算不算学术不端，请各位老师斧正。 +11 mahl005 2026-06-14 12/600 2026-06-18 17:01 by 770904134
[基金申请] 希望面上有个好结果 +7 碧水00 2026-06-16 7/350 2026-06-18 12:18 by wuke100666
[论文投稿] 三区计算机方向期刊推荐 +5 1457340941 2026-06-15 5/250 2026-06-17 13:16 by 会议编辑
[论文投稿] sci论文二审求助 +5 潘倍倍 2026-06-15 5/250 2026-06-16 10:15 by xs74101122
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭