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lpz598417258铁虫 (初入文坛)
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[求助]
多糖分离纯化求助，DEAE-52 已有2人参与
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本人做多糖纯化，梯度洗脱，跑了四次，都不理想。求哪位分离纯化帮忙，求顺利毕业！！ 现在把就具体的参数说明下：填料DEAE-52，柱子为2.6*40，0.1,0.2,0.3,0.4,0.5 NaCl Tris-HCl溶液洗脱，多糖分子量是10万 Da左右。 讲实话，这些图我自己都看不下去了。实验的我做的真是没脾气，想请教哪位大神可以帮我分析下这些洗脱图。给点意见，到底是我参数没有设定好，还是柱子或者填料选择有问题？？  第一次，上样量100mg 流速：1ml/ml 每管1min 每个梯度跑80根管，但隔空测定，每个梯度40根管。  第二次，参数同第一次。第一次单是用缓冲液就直接全冲出来了，怀疑是柱子没填实，此次将柱子附加了填料，并压实。  第三次，参数同第一次。  第四次，总结前三次，怀疑是流速太大，低极性浓度时就全洗出了。这次将填料用酸碱和水处理，再生了下。参数调整为上样量为25mg, 0.5 ml/min 每个梯度收集20根管，没根管10min。依次测定 |
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7楼2016-07-26 10:55:50
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