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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 花青素提取检测
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583464303

新虫 (初入文坛)

[求助] 花青素提取检测 已有3人参与

请教各位大神，我最近在做花青素提取检测的实验，查阅文献检测方法不同，有的用色阶表示，有的用含量表示，请赐教，另外，在提取花青素的时候需要加酸吗？谢谢！
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顺其自然
1楼 2016-07-19 15:23:52
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

鹤影魂

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
583464303: 金币+35, ★★★很有帮助 2016-07-20 14:49:20
1，酸性甲醇的配置：99% 甲醇 + 1% HCl；

2，将新鲜材料置于酸性甲醇中，此时记得称下材料的鲜重，一般为100mg左右，记录。所有的材料所用的酸性甲醇体积相同，比如同为10ml；

3，将以上准备好的样品置于4℃，12h 左右，使溶液浸透材料（材料最好事先研磨碎）

4，离心，取上清，用分光光度计在 530nm 和 657nm 处测吸光度，分别记作 A530 和 A657；

5，相对浓度的计算：ΔA=A530 - 1/4A657，此处 A657 用来矫正叶绿素等杂质的影响；

6，相对浓度最终表示：ΔA/FW，即 ΔA 除以鲜重（单位为g）。也即是ΔA g-1 FW。

以上是本人根据一些文献的总结

参考文献如下，在材料方法中查看：

Weiss D, Halevy A H. Stamens and gibberellin in the regulation of corolla pigmentation and growth in Petunia hybrida[J]. Planta, 1989, 179(1): 89-96.

Meng X, Wang X. Regulation of ower development and anthocyanin accumulation in Gerbera hybrida[J]. The Journal of Horticultural Science and Biotechnology, 2004, 79(1): 131-137.
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微信公众号：植物科学SCI
3楼2016-07-19 22:54:07
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鹤影魂

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 583464303 at 2016-07-20 12:50:43
谢谢你，很详细，就是想问问您这个方法的适用性，还有就是您有见过用CV（色价来表示花青素的吗？）...

我就是用分光光度计测个相对量，测拟南芥的。具体可以自己试试，多试几个方法

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8楼2016-07-20 14:38:35
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yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
583464303: 金币+2, ★有帮助, 谢谢！ 2016-07-20 12:47:49
先看综述，
然后找影响因子高的文章，
根据里面的方法，结合自己的实验室情况，进行具体的操作
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2楼2016-07-19 20:34:02
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583464303

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yang0071 at 2016-07-19 20:34:02
先看综述，
然后找影响因子高的文章，
根据里面的方法，结合自己的实验室情况，进行具体的操作

额，这个我都查了，所以才问问一般市售花青素的检测方法依据！
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顺其自然
4楼2016-07-20 12:47:02
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583464303

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 鹤影魂 at 2016-07-19 22:54:07
1，酸性甲醇的配置：99% 甲醇 + 1% HCl；

2，将新鲜材料置于酸性甲醇中，此时记得称下材料的鲜重，一般为100mg左右，记录。所有的材料所用的酸性甲醇体积相同，比如同为10ml；

3，将以上准备好的样品置于4℃， ...

谢谢你，很详细，就是想问问您这个方法的适用性，还有就是您有见过用CV（色价来表示花青素的吗？）
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顺其自然
5楼2016-07-20 12:50:43
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xiechunzhi

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
要加酸的。可以用高效液相色谱法，与标准品对照

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爱拼才会赢
6楼2016-07-20 13:07:51
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583464303

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by xiechunzhi at 2016-07-20 13:07:51
要加酸的。可以用高效液相色谱法，与标准品对照

请问您这边提取怎么甲酸，大致什么条件，谢谢了。
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顺其自然
7楼2016-07-20 14:18:25
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达芬奇的密码

新虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 鹤影魂 at 2016-07-19 22:54:07
1，酸性甲醇的配置：99% 甲醇 + 1% HCl；

2，将新鲜材料置于酸性甲醇中，此时记得称下材料的鲜重，一般为100mg左右，记录。所有的材料所用的酸性甲醇体积相同，比如同为10ml；

3，将以上准备好的样品置于4℃， ...

我做的曲线跟文献的不同，怎么破呀？遇酸碱有不同颜色的成分除了花青素还有其他成分吗
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9楼2016-08-01 22:41:04
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鹤影魂

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 达芬奇的密码 at 2016-08-01 22:41:04
我做的曲线跟文献的不同，怎么破呀？遇酸碱有不同颜色的成分除了花青素还有其他成分吗...

这个其实我也不太清楚，我只做过一两次，也没有做过什么曲线，不好意思，帮不了你啊

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10楼2016-08-01 22:57:40
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