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583464303

新虫 (初入文坛)

[求助] 花青素提取检测 已有3人参与

请教各位大神,我最近在做花青素提取检测的实验,查阅文献检测方法不同,有的用色阶表示,有的用含量表示,请赐教,另外,在提取花青素的时候需要加酸吗?谢谢!
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顺其自然
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鹤影魂

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
583464303: 金币+35, ★★★很有帮助 2016-07-20 14:49:20
1,酸性甲醇的配置:99% 甲醇 + 1% HCl;

2,将新鲜材料置于酸性甲醇中,此时记得称下材料的鲜重,一般为100mg左右,记录。所有的材料所用的酸性甲醇体积相同,比如同为10ml;

3,将以上准备好的样品置于4℃,12h 左右,使溶液浸透材料(材料最好事先研磨碎)

4,离心,取上清,用分光光度计在 530nm 和 657nm 处测吸光度,分别记作 A530 和 A657;

5,相对浓度的计算:ΔA=A530 - 1/4A657,此处 A657 用来矫正叶绿素等杂质的影响;

6,相对浓度最终表示:ΔA/FW,即 ΔA 除以鲜重(单位为g)。也即是ΔA g-1 FW。

以上是本人根据一些文献的总结

参考文献如下,在材料方法中查看:

Weiss D, Halevy A H. Stamens and gibberellin in the regulation of corolla pigmentation and growth in Petunia hybrida[J]. Planta, 1989, 179(1): 89-96.

Meng X, Wang X. Regulation of ower development and anthocyanin accumulation in Gerbera hybrida[J]. The Journal of Horticultural Science and Biotechnology, 2004, 79(1): 131-137.
微信公众号:植物科学SCI
3楼2016-07-19 22:54:07
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鹤影魂

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 583464303 at 2016-07-20 12:50:43
谢谢你,很详细,就是想问问您这个方法的适用性,还有就是您有见过用CV(色价来表示花青素的吗?)...

我就是用分光光度计测个相对量,测拟南芥的。具体可以自己试试,多试几个方法

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微信公众号:植物科学SCI
8楼2016-07-20 14:38:35
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普通回帖

yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
583464303: 金币+2, 有帮助, 谢谢! 2016-07-20 12:47:49
先看综述,
然后找影响因子高的文章,
根据里面的方法,结合自己的实验室情况,进行具体的操作
2楼2016-07-19 20:34:02
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583464303

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yang0071 at 2016-07-19 20:34:02
先看综述,
然后找影响因子高的文章,
根据里面的方法,结合自己的实验室情况,进行具体的操作

额,这个我都查了,所以才问问一般市售花青素的检测方法依据!
顺其自然
4楼2016-07-20 12:47:02
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583464303

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 鹤影魂 at 2016-07-19 22:54:07
1,酸性甲醇的配置:99% 甲醇 + 1% HCl;

2,将新鲜材料置于酸性甲醇中,此时记得称下材料的鲜重,一般为100mg左右,记录。所有的材料所用的酸性甲醇体积相同,比如同为10ml;

3,将以上准备好的样品置于4℃, ...

谢谢你,很详细,就是想问问您这个方法的适用性,还有就是您有见过用CV(色价来表示花青素的吗?)
顺其自然
5楼2016-07-20 12:50:43
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xiechunzhi

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
要加酸的。可以用高效液相色谱法,与标准品对照

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爱拼才会赢
6楼2016-07-20 13:07:51
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583464303

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by xiechunzhi at 2016-07-20 13:07:51
要加酸的。可以用高效液相色谱法,与标准品对照

请问您这边提取怎么甲酸,大致什么条件,谢谢了。
顺其自然
7楼2016-07-20 14:18:25
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达芬奇的密码

新虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 鹤影魂 at 2016-07-19 22:54:07
1,酸性甲醇的配置:99% 甲醇 + 1% HCl;

2,将新鲜材料置于酸性甲醇中,此时记得称下材料的鲜重,一般为100mg左右,记录。所有的材料所用的酸性甲醇体积相同,比如同为10ml;

3,将以上准备好的样品置于4℃, ...

我做的曲线跟文献的不同,怎么破呀?遇酸碱有不同颜色的成分除了花青素还有其他成分吗
9楼2016-08-01 22:41:04
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鹤影魂

木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 达芬奇的密码 at 2016-08-01 22:41:04
我做的曲线跟文献的不同,怎么破呀?遇酸碱有不同颜色的成分除了花青素还有其他成分吗...

这个其实我也不太清楚,我只做过一两次,也没有做过什么曲线,不好意思,帮不了你啊

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微信公众号:植物科学SCI
10楼2016-08-01 22:57:40
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