24小时热门版块排行榜    

查看: 2829  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

dingxianlo

金虫 (正式写手)

[求助] 根癌农杆菌单克隆摇菌摇不出来 已有2人参与

各位大侠,有个问题想请教大家!本实验室做的转基因,将含目的基因的过表达载体转化到根癌农杆菌EHA105感受态细胞后涂于YEB固体培养基(含50ug/ml Kana和50ug/ml Rif)能正常长出单克隆,可是小摇和大摇只有极少数能摇出来,而且小摇菌检都有目的条带。小摇和大摇抗生素浓度与固体培养基一致。以前都是能正常摇出来的,可是从这学期开始不知咋的,老是出问题,请大家赐教!
回复此楼

» 猜你喜欢

未来掌握在自己手中,希望通过这个网站认识更多的朋友,能在学习、工作、生活上相互帮忙。爱拼才会赢!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuy111

银虫 (正式写手)


【答案】应助回帖


dingxianlo: 金币+1, 有帮助 2016-09-09 23:03:36
Bigger volume culture may need pay attention to the ventilation, a 1000 ml bottle cannot culture more than 200 ml for the better growth . Temperature should be checked as well.
3楼2016-09-09 09:46:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

ccqqsunshine

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


dingxianlo: 金币+1, 有帮助 2016-09-09 23:03:53
EHA105自身基因组抗性rif,vir质粒抗性strep,目标基因kana的话我建议你三种抗生素筛出单克隆再继续摇菌吧,
摇菌体积至少1:10容积比这样保证培养没有问题:1ml菌在10ml的指形管(或其他)里摇;
另外你用个温度计测下摇床温度,因为摇没摇你能看到,但温度有时出问题,不好发现。
2楼2016-09-07 00:14:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tuodecai

铁杆木虫 (著名写手)

请问你这个问题后来是怎么解决,找到什么原因了吗?我最近跟你遇到简直一模一样的问题,最近老是小摇可以了,再大摇就不行了。真是搞死我了,这个问题困扰我几个月了希望能得到你的帮助。谢谢!
4楼2018-05-30 20:30:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 328求调剂,英语六级551,有科研经历 +6 生物工程调剂 2026-03-17 10/500 2026-03-22 20:22 by edmund7
[考研] 招08考数学 +4 laoshidan 2026-03-20 8/400 2026-03-22 19:56 by 小皮蛋酱
[考研] 305分求调剂(食品工程) +4 Sxy112 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:26 by 无懈可击111
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 一志愿070300浙大化学358分,求调剂! +3 酥酥鱼.. 2026-03-21 3/150 2026-03-22 11:31 by 杨杨杨紫
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +6 自由煎饼果子 2026-03-16 6/300 2026-03-21 17:21 by 学员8dgXkO
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
[考研] 材料工程(专)一志愿985 初试335求调剂 +3 hiloiy 2026-03-17 4/200 2026-03-21 03:04 by JourneyLucky
[考研] 化学求调剂 +4 临泽境llllll 2026-03-17 5/250 2026-03-21 02:23 by JourneyLucky
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂,总分315(英一) +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 一志愿福大288有机化学,求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 328求调剂,英语六级551,有科研经历 +4 生物工程调剂 2026-03-16 12/600 2026-03-19 11:10 by 生物工程调剂
[考研] 本科郑州大学物理学院,一志愿华科070200学硕,346求调剂 +4 我不是一根葱 2026-03-18 4/200 2026-03-19 09:11 by 浮云166
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
[考研] 085601专硕,总分342求调剂,地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
信息提示
请填处理意见