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lx910615新虫 (小有名气)
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western blot 求助,荧光猝灭的很快,请各位指点一二。 已有3人参与
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| 求助,破碎菌体得胞内蛋白,做western,1抗(自制)1:2000 摇床1h,4℃过夜,TBST洗膜6次/10min, 二抗1:5000 1.5h,TBST洗膜3次/10min,TBS洗一次。碧云天ECL发光液1:1,荧光猝灭的很快,请各位指点一二。 |
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ericyo918
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3楼2016-07-15 14:28:13
314300420
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猝灭有两种,一种是膜上结合的HRP太多,导致底物快速耗尽,此时膜上会留下黄褐色条带的印迹,另一种是有ECL液体时在发光,吸掉后很快荧光消失,这种情况是有污染物存在,别问我具体是什么污染,我也不清楚 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2016-07-14 17:45:55
lx910615
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4楼2016-07-16 12:40:04
lx910615
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