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liuxinchao

新虫 (正式写手)

[交流] 感觉自己中魔咒了 已有10人参与

PCR扩增,跑着跑着就木有目的条带了,前几次有,再过几天跑就木有了,大神们,这是什么赶脚??自己还能毕业吗?

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ChengZQ

新虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你是说PCR扩增产物后续跑胶没有条带还是后面P不出来了?
2楼2016-07-12 10:19:50
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liuxinchao

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ChengZQ at 2016-07-12 10:19:50
你是说PCR扩增产物后续跑胶没有条带还是后面P不出来了?

就是前几天跑胶有目的条带,过几天再用相同的程序,方法跑就木有了。引物是新合的

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3楼2016-07-12 10:31:40
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ls2046

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎发帖交流 2016-07-12 14:58:17
是不是模板出了问题?问题很正常,模板重新制备,重新PCR,不断努力,这种问题总能解决。
一品黄山
4楼2016-07-12 10:53:56
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liuxinchao

新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ls2046 at 2016-07-12 10:53:56
是不是模板出了问题?问题很正常,模板重新制备,重新PCR,不断努力,这种问题总能解决。

会不会温度高了,模板降解了?

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5楼2016-07-12 11:32:58
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ls2046

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 应助指数+1 2016-07-12 14:58:25
引用回帖:
5楼: Originally posted by liuxinchao at 2016-07-12 11:32:58
会不会温度高了,模板降解了?
...

降解的原因很多,不一定是温度的原因,还是看模板纯度,尤其是基因组DNA,由于污染问题,很容易降解。
一品黄山
6楼2016-07-12 11:35:52
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flhua

木虫 (正式写手)

bachelordom

可以用以前PCR的产物作为模板 试试吧 或许能解决
只要有梦想,坚持就一定能实现
7楼2016-07-12 12:34:18
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liuxinchao

新虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by flhua at 2016-07-12 12:34:18
可以用以前PCR的产物作为模板 试试吧 或许能解决

还可以这样?本人研一不大懂

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8楼2016-07-12 13:12:50
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ChengZQ

新虫 (职业作家)


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引用回帖:
3楼: Originally posted by liuxinchao at 2016-07-12 10:31:40
就是前几天跑胶有目的条带,过几天再用相同的程序,方法跑就木有了。引物是新合的
...

有可能是基因组dna降解了,也有可能是某个环节出问题,比如pcr试剂污染等等,重新提取基因组试试看

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9楼2016-07-12 14:28:50
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ChengZQ

新虫 (职业作家)

引用回帖:
8楼: Originally posted by liuxinchao at 2016-07-12 13:12:50
还可以这样?本人研一不大懂
...

可以用啊,但一般要纯化回收后才能作为模板

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10楼2016-07-12 14:29:52
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