应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » DEAE纤维素纯化蛋白 关于缓冲液和洗脱液
51/1返回列表
查看: 3548  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

calendar7

银虫 (小有名气)

[求助] DEAE纤维素纯化蛋白 关于缓冲液和洗脱液 已有5人参与

我想问下：
问题一：平衡DEAE纤维素柱子用什么缓冲剂平衡，我用的Ph=3.5甲酸-甲酸钠缓冲液平衡，可以吗？
问题二：洗脱液怎么配置，是在缓冲液中加入NaCl吗？还是用不同浓度的NaCl进行洗脱？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-07-11 20:25:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小李爱学习

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

根据文献大致了解你的蛋白的PI。如果不确定就做试管实验看看各个pH条件下DEAE纤维素对蛋白的吸附情况。做之前蛋白要用不同pH的缓冲液透析充分，DEAE纤维素用所对应的缓冲液平衡好。摇床缓慢摇晃过夜，看看溶液中蛋白吸附的情况。建议缓冲液浓度不要超过50 mM.
赞一下 回复此楼
9楼2016-07-16 03:51:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

w911227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
calendar7(shenyingbin代发): 金币+2, 感谢应助 2016-10-12 18:53:25
DEAE纤维素是阴离子交换柱，我们一般用它来分离多糖，分离蛋白我们实验室都用阳离子交换柱，像羧甲基纤维素什么的。洗脱液是用缓冲液配制的。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

calendar7
苦难的日子终将逝去，但强者却永存
2楼2016-07-11 20:30:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

calendar7

银虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by w911227 at 2016-07-11 20:30:35
DEAE纤维素是阴离子交换柱，我们一般用它来分离多糖，分离蛋白我们实验室都用阳离子交换柱，像羧甲基纤维素什么的。洗脱液是用缓冲液配制的。

谢谢，DEAE是可以纯化蛋白的，我想问下平衡柱子的缓冲液是怎样选择的，我做的实验稀里糊涂的，谢谢大神
赞一下 回复此楼
3楼2016-07-11 20:49:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

w911227

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by calendar7 at 2016-07-11 20:49:34
谢谢，DEAE是可以纯化蛋白的，我想问下平衡柱子的缓冲液是怎样选择的，我做的实验稀里糊涂的，谢谢大神...

哦哦，你应该有参考相应的文献才选择的DEAE吧？我们一般都是根据文献来判断的，我们实验室用的是醋酸盐缓冲液
赞一下 回复此楼
苦难的日子终将逝去，但强者却永存
4楼2016-07-12 11:20:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 302求调剂 +10 呼呼呼。。。。 2026-03-17 10/500 2026-03-18 12:45 by Linda Hu
[考研] 277调剂 +5 自由煎饼果子 2026-03-16 6/300 2026-03-17 19:26 by 李leezz
[考研] 268求调剂 +8 一定有学上- 2026-03-14 9/450 2026-03-17 17:47 by laoshidan
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:27 by Little-xue
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +16 不知道叫什么！ 2026-03-15 18/900 2026-03-17 17:05 by ruiyingmiao
[考研] 278求调剂 +3 Yy7400 2026-03-13 3/150 2026-03-17 08:24 by laoshidan
[考研] 一志愿，福州大学材料专硕339分求调剂 +3 木子momo青争 2026-03-15 3/150 2026-03-17 07:52 by laoshidan
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-14 3/150 2026-03-16 16:39 by houyaoxu
[考研] 一志愿华中师范071000，325求调剂 +6 RuitingC 2026-03-12 6/300 2026-03-16 14:50 by 可淡不可忘
[考研] 0703 物理化学调剂 +3 我可以上岸的对� 2026-03-13 5/250 2026-03-16 10:50 by 我可以上岸的对�
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历，论文在投 +7 腻腻gk 2026-03-14 7/350 2026-03-16 10:12 by houyaoxu
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-03-13 4/200 2026-03-14 08:37 by zhukairuo
[考研] 招收0805（材料）调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 304求调剂 +6 Mochaaaa 2026-03-12 7/350 2026-03-13 22:18 by 星空星月
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +6 步川酷紫123 2026-03-13 6/300 2026-03-13 21:59 by 星空星月
[考研] 281求调剂 +9 Koxui 2026-03-12 11/550 2026-03-13 20:50 by Koxui
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +8 困于星晨 2026-03-12 10/500 2026-03-13 15:42 by ms629
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[考研] 290求调剂 +7 ADT 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-12 4/200 2026-03-12 19:33 by 求调剂zz
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭