| 查看: 1531 | 回复: 9 | ||
[求助]
质粒酶切 已有3人参与
|
|
各位学友：我再用Kpn1和Sac1酶切我构建的载体pBI121—GFP,没有切到我的目标基因GFP，在此求助。 我用的体系是40μl 建立如下双酶切反应体系: dH2O 14μl 10XL buffer 4μl 质粒DNA 20μl Kpn1 1μl Sac1 1μl (2)37℃保温 5h (3)65℃保温 10 min灭活限制酶" |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有214人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
18716248350
新虫 (小有名气)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 948.8
- 散金: 36
- 红花: 2
- 帖子: 247
- 在线: 116小时
- 虫号: 4438910
- 注册: 2016-02-26
- 专业: 预防医学其他科学问题
2楼2016-07-10 17:28:39
18716248350
新虫 (小有名气)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 948.8
- 散金: 36
- 红花: 2
- 帖子: 247
- 在线: 116小时
- 虫号: 4438910
- 注册: 2016-02-26
- 专业: 预防医学其他科学问题
3楼2016-07-10 17:29:00
18716248350
新虫 (小有名气)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 948.8
- 散金: 36
- 红花: 2
- 帖子: 247
- 在线: 116小时
- 虫号: 4438910
- 注册: 2016-02-26
- 专业: 预防医学其他科学问题
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-11 06:59:11
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-11 06:59:11
|
哎呀，实在不好意思，这手机出问题了，首先考虑重组载体上是否连上了GFP，然后两个酶公用buffer有没选对，酶有没有过期，你质粒浓度多大的加了20ul，一般1ul酶切1ug质粒，然后过夜酶切效果会较好，如果要回收可以先用20ul小体系切开了再加大体积做回收 发自小木虫Android客户端 |
4楼2016-07-10 17:33:01
感谢参与，应助指数 +1
|
本帖内容被屏蔽 |
5楼2016-07-11 00:27:01
凯伦爱佳佳
金虫 (正式写手)
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 1571.1
- 散金: 97
- 红花: 1
- 帖子: 321
- 在线: 75.5小时
- 虫号: 3487227
- 注册: 2014-10-20
- 性别: GG
- 专业: 水产生物免疫学与病害控制
6楼2016-07-11 00:52:15
7楼2016-07-11 10:28:47
鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
- 应助: 183 (高中生)
- 金币: 3100.2
- 散金: 19
- 红花: 12
- 帖子: 1427
- 在线: 186.8小时
- 虫号: 2538789
- 注册: 2013-07-09
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
8楼2016-07-11 17:02:37
9楼2016-07-12 08:12:41
18716248350
新虫 (小有名气)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 948.8
- 散金: 36
- 红花: 2
- 帖子: 247
- 在线: 116小时
- 虫号: 4438910
- 注册: 2016-02-26
- 专业: 预防医学其他科学问题
10楼2016-07-12 09:33:54