| 查看: 1273 | 回复: 4 | ||
[求助]
Amp板子上长了好多杂菌！问题比较复杂，请各位进来看。很急，请各位大神给点建议！ 已有1人参与
|
|
最近在做转化效率，酶切效率，和连接效率的检验。 我们用了一个带有sfgfp绿色荧光的质粒（带有Amp抗性），转到感受态里面, 涂A+的板子 （3个平行）； 再用双酶切这个质粒，把sfgfp去掉，回收，再把backbone和感受态混合，涂板（3个）；再一组双酶切，切胶回收backbone 和 sfgfp，quickligase连接,然后转入感受态（3个）。 14个小时之后，第一组转化：很多菌落，几千个左右吧，3/4的绿色。 第二组，酶切---很多菌落（几十个~一百个吧）只有一个亮的。 第三组连接-----很多菌落（一百个吧），有四个亮的。 想问下为什么会有这种情况，这个实验重复了好多次，每次几乎都这样。 长了很多没有绿色荧光的杂菌。 非常不合理，本来只有绿色荧光的质粒才有Amp抗性啊！ |
回复此楼» 猜你喜欢
表哥与省会女结婚，父母去帮带孩子被省会女气回家生重病了
已经有12人回复
-
依托企业入选了国家启明计划青年人才。有无高校可以引进的。
已经有14人回复
-
江汉大学解明教授课题组招博士研究生/博士后
已经有3人回复
-
AI 太可怕了，写基金时，提出想法，直接生成的文字比自己想得深远，还有科学性
已经有11人回复
-
同年申请2项不同项目，第1个项目里不写第2个项目的信息，可以吗
已经有10人回复
-
依托企业入选了国家启明计划青年人才。有无高校可以引进的。
已经有11人回复
2楼2016-07-02 15:46:50
3楼2016-07-03 11:47:31
鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
- 应助: 183 (高中生)
- 金币: 3100.2
- 散金: 19
- 红花: 12
- 帖子: 1427
- 在线: 186.8小时
- 虫号: 2538789
- 注册: 2013-07-09
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
4楼2016-07-06 15:50:28
5楼2016-07-07 14:17:40