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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 最近在做木醋杆菌的相关试验，可是做电转涂板抗性板上都不长，难...
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zxx8820

新虫 (小有名气)

[求助] 最近在做木醋杆菌的相关试验，可是做电转涂板抗性板上都不长，难...

最近在做木醋杆菌的相关试验，可是做电转涂板抗性板上都不长，难道是我感受态的问题还是电转条件的问题？可是是按照文献上写的做的啊。有没有做这个方面的，给提个建议啊，谢谢啦 @biostar2009

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1楼 2016-07-02 14:46:49
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51mimi

新虫 (小有名气)
电传对宿主有很大损伤，做之前所有东西要放在冰上，准备最适温度的培养基，转化完以后立即加入培养基恢复

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2楼2016-07-03 11:18:07
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51mimi

新虫 (小有名气)
感受太不能用自己化学离子如氯化钙制备的

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3楼2016-07-03 11:20:06
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zxx8820

新虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by 51mimi at 2016-07-03 11:18:07
电传对宿主有很大损伤，做之前所有东西要放在冰上，准备最适温度的培养基，转化完以后立即加入培养基恢复

是这样操作的，复苏的时候也长了，可是在涂抗性板的时候，只有无抗板长，所有的抗性板都不长，难得是因为质粒没转进去吗？还是说这个质粒在我的菌中不表达呢？

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4楼2016-07-04 09:16:13
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51mimi

新虫 (小有名气)
抗性对吗，浓度可以用下合理范围内的梯度

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5楼2016-07-04 12:34:44
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zxx8820

新虫 (小有名气)
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5楼: Originally posted by 51mimi at 2016-07-04 12:34:44
抗性对吗，浓度可以用下合理范围内的梯度

只要是有抗性的就长不了，难道是没转不进去吗？那有什么方法可以转进去啊？

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6楼2016-07-04 15:45:57
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51mimi

新虫 (小有名气)
f

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7楼2016-07-05 06:59:22
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51mimi

新虫 (小有名气)
复苏的时候，用复苏培养基不加抗性，涂板才加。不知道你感受态怎么来的，如果是买的一般都有配套质粒做电转阳性对照，电极杯也有相应规格型号要根据宿主情况选择

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8楼2016-07-05 07:10:08
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zxx8820

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 51mimi at 2016-07-05 07:10:08
复苏的时候，用复苏培养基不加抗性，涂板才加。不知道你感受态怎么来的，如果是买的一般都有配套质粒做电转阳性对照，电极杯也有相应规格型号要根据宿主情况选择

嗯，是的，复苏的时候没有加抗性。感受态是我按照文献自己做的，难道是感受态的原因？？

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9楼2016-07-05 15:26:26
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51mimi

新虫 (小有名气)
第一次给你回复就说过，不能用氯化钙等可以带离子进去的方法制备，对电击有影响

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10楼2016-07-05 16:17:33
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