24小时热门版块排行榜    

查看: 745  |  回复: 3

反对派

银虫 (正式写手)

[交流] 试管内合成cDNA双链时(T-A)组成的双链由什么酶去掉? 已有1人参与

请教各位同行:试管内合成cDNA双链时,DNA聚合酶I 延伸后,会形成连续的(T-A)n组成的双链。这个双链最后是由什么酶去掉的?
望不吝赐教为谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xn8008

至尊木虫 (知名作家)

Balance Angel


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不知道你说的去除TA是什么意思,是不是指第一链合成的过程,你看看PCR三个步骤的名称就明白了,还有,第一链被逆转录完成之后,通过其中一种引物可以结合聚合出互补链,接下来的过程就是普通的PCR的过程了。之所以在RT的过程中只合成第一链,因为RT过程是需要逆转录酶,工作温度37℃,同时使用的是随机引物或者是oligo-dT;而PCR过程使用高温DNA聚合酶,工作温度72℃,同时使用的是特异的扩增引物.两个体系没有办法同时进行,就分开来做,那逆转录自然就只转录第一链了
奋斗是我们前进的动力!
2楼2016-06-30 13:37:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

反对派

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xn8008 at 2016-06-30 13:37:57
不知道你说的去除TA是什么意思,是不是指第一链合成的过程,你看看PCR三个步骤的名称就明白了,还有,第一链被逆转录完成之后,通过其中一种引物可以结合聚合出互补链,接下来的过程就是普通的PCR的过程了。之所以在R ...

你好谢谢回复。常规的过程很很熟悉。我问的意思是最后的PCR产生的双链DNA中,终止密码子后的一连串的T-A配对的双链部分是怎么去掉的?用什么酶,没有哪一本教科书讲到这个问题。
3楼2016-06-30 16:18:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

反对派

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xn8008 at 2016-06-30 13:37:57
不知道你说的去除TA是什么意思,是不是指第一链合成的过程,你看看PCR三个步骤的名称就明白了,还有,第一链被逆转录完成之后,通过其中一种引物可以结合聚合出互补链,接下来的过程就是普通的PCR的过程了。之所以在R ...

如果你有人卫版生物化学与分子生物学第8版,请参看295页,就明白我的问题了。
4楼2016-06-30 16:25:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 反对派 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 6/300 2026-08-30 13:54 by GkCVyODlx4mR
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 7/350 2026-08-30 12:13 by l0VvVHGBGRLv
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 11:52 by l0VvVHGBGRLv
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 11:41 by l0VvVHGBGRLv
[公派出国] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 11:32 by l0VvVHGBGRLv
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 06:22 by ZPa0EcMwuECS
[教师之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 05:48 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
请填处理意见