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xiaozzjin银虫 (小有名气)
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HPLC谱图求助已有4人参与
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最近刚接触HPLC，目前在用HPLC分析地塞米松，采用实验室已经建立的方法（前人验证很多次，都没问题），用C18柱子，流动相为乙腈/水（40/60），但是我现在的得到的谱图如下： [/img]地塞米松在6.5分钟出峰，峰面积704，旁边有一个杂峰，面积为144。 地塞米松购自Sigma，纯度应该没有问题。刚开始怀疑柱子污染了，换了新的C18柱子，但是还是相同的结果。 后来固定了地塞米松的浓度，改变了一系列条件： 更改乙腈/水比例，70/30，50/50，40/60，30/70，出峰时间有变化，谱图形状不变，两个峰面积的比例也不变。 更改紫外检测波长， 240，254，270，谱图形状不变，两个峰面积的比例也不变。 更改进样量，5uL，20uL，40uL，两个峰面积都减小，但两个峰面积的比例不变。 大家看谱图，那个小的峰算杂质峰还是算拖尾呢？ 对HPLC是新手，现在不知道该如何改进了。在此，请教各位高手，非常感谢。@鸭绿江畔@superyeast@wyy080214@klicking@学术巨星 |
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