24小时热门版块排行榜    

查看: 2425  |  回复: 30
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xiaozzjin

银虫 (小有名气)

[求助] HPLC谱图求助 已有4人参与

最近刚接触HPLC,目前在用HPLC分析地塞米松,采用实验室已经建立的方法(前人验证很多次,都没问题),用C18柱子,流动相为乙腈/水(40/60),但是我现在的得到的谱图如下:
HPLC谱图求助[/img]

地塞米松在6.5分钟出峰,峰面积704,旁边有一个杂峰,面积为144。

地塞米松购自Sigma,纯度应该没有问题。刚开始怀疑柱子污染了,换了新的C18柱子,但是还是相同的结果。

后来固定了地塞米松的浓度,改变了一系列条件:
更改乙腈/水比例,70/30,50/50,40/60,30/70,出峰时间有变化,谱图形状不变,两个峰面积的比例也不变。
更改紫外检测波长, 240,254,270,谱图形状不变,两个峰面积的比例也不变。
更改进样量,5uL,20uL,40uL,两个峰面积都减小,但两个峰面积的比例不变。

大家看谱图,那个小的峰算杂质峰还是算拖尾呢?

对HPLC是新手,现在不知道该如何改进了。在此,请教各位高手,非常感谢。@鸭绿江畔@superyeast@wyy080214@klicking@学术巨星
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangli_sisi

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
还是感觉样品被污染的可能性较大,比如配样的容量瓶不干净。有没有重新配样后进针?
4楼2016-06-30 08:46:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 31 个回答

sarredongdhw

铜虫 (正式写手)

全部用水或全部用乙腈过呢

发自小木虫IOS客户端
D
2楼2016-06-30 07:29:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaozzjin

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sarredongdhw at 2016-06-30 00:29:11
全部用水或全部用乙腈过呢

你说的是把流动相换成纯水或纯已腈吗?这两个倒是没有尝试。我要是尝试这两种能看出什么啊?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2016-06-30 08:07:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

superyeast

专家顾问 (职业作家)

sigma 也不是100%保险。你可以做个核磁检查一下。如果真有问题的话给他们的客服打电话,一般会免费更换。

发自小木虫Android客户端
5楼2016-06-30 09:22:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 1Nb0IVlmV6v0 2026-11-11 4/200 2026-11-13 11:18 by Equinoxhua
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 10/500 2026-11-13 11:08 by Equinoxhua
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 6/300 2026-11-13 11:04 by Equinoxhua
[考博] 27博士申请(市政/环境) +3 ladf 2026-11-12 3/150 2026-11-13 08:19 by Equinoxhua
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 5/250 2026-11-12 12:28 by ECLTXnJnRSXf
[基金申请] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:33 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 6/300 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 8/400 2026-11-12 11:00 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 10/500 2026-11-12 09:52 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +8 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 12/600 2026-11-12 09:21 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 3/150 2026-11-12 08:26 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 08:15 by HajghKOMynmz
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 3/150 2026-11-12 07:53 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 6/300 2026-11-12 07:09 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 9/450 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 6/300 2026-11-11 17:03 by TgvkbZZl9tqB
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 16/800 2026-11-09 11:47 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 10/500 2026-11-09 08:00 by IhnEQauGmT3K
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-09 00:14 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-08 22:46 by l48hFd8Nwae2
信息提示
请填处理意见