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bubu_0123

金虫 (初入文坛)

[求助] MTT毒性实验,OD值太小 已有3人参与

我做的A549细胞,每孔种了6000个,很均匀,加药作用4h,然后加MTT20μL/孔,再作用4h,然后吸弃,加DMSO 150μL/孔,震荡5-10min,490nm测OD值,结果仅有0.09-0.1的样子,阴性对照也仅为0.11-0.12左右。求各位大神指点,到底为啥OD值这么小,这样的数值不可靠吧。
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抚琴建业

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

在开始做MTT前,你是否有观察过你的细胞,特别的阴性对照组(应该是不加药的吧?)的细胞是否长密度和状态呢?我是用A549做CCK-8实验,每孔种的细胞就2500,1个半小时阴性对照组的OD值就到1点多了。
5楼2016-09-13 17:42:09
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51mimi

新虫 (小有名气)

|首先你要了解你的药物作用浓度和作用时间,再来做M T T的时候要留意培养基不加血清,原来有血清的要换液

发自小木虫IOS客户端
2楼2016-07-03 12:06:50
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xiongyou

新虫 (初入文坛)

我也是,我觉得有可能是因为细胞密度小。或者说是药物毒性太大,需要稀释。
3楼2016-08-01 20:51:23
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mickle_2011

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

有没有可能是你在加DMSO前吸弃液体时把固定细胞吸走的缘故?可以让其他同学帮你操作一遍,看看是不是自己操作失误导致的,或者自己在吸弃前后先大概观察一下有无明显变化。
4楼2016-08-09 16:15:27
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