24小时热门版块排行榜    

查看: 3494  |  回复: 7

bubu_0123

金虫 (初入文坛)

[求助] MTT毒性实验,OD值太小 已有3人参与

我做的A549细胞,每孔种了6000个,很均匀,加药作用4h,然后加MTT20μL/孔,再作用4h,然后吸弃,加DMSO 150μL/孔,震荡5-10min,490nm测OD值,结果仅有0.09-0.1的样子,阴性对照也仅为0.11-0.12左右。求各位大神指点,到底为啥OD值这么小,这样的数值不可靠吧。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

51mimi

新虫 (小有名气)

|首先你要了解你的药物作用浓度和作用时间,再来做M T T的时候要留意培养基不加血清,原来有血清的要换液

发自小木虫IOS客户端
2楼2016-07-03 12:06:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiongyou

新虫 (初入文坛)

我也是,我觉得有可能是因为细胞密度小。或者说是药物毒性太大,需要稀释。
3楼2016-08-01 20:51:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mickle_2011

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

有没有可能是你在加DMSO前吸弃液体时把固定细胞吸走的缘故?可以让其他同学帮你操作一遍,看看是不是自己操作失误导致的,或者自己在吸弃前后先大概观察一下有无明显变化。
4楼2016-08-09 16:15:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

抚琴建业

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

在开始做MTT前,你是否有观察过你的细胞,特别的阴性对照组(应该是不加药的吧?)的细胞是否长密度和状态呢?我是用A549做CCK-8实验,每孔种的细胞就2500,1个半小时阴性对照组的OD值就到1点多了。
5楼2016-09-13 17:42:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

MTT的浓度是否合适,浓度太小反应不会明显,MTT反应完建议你别急着用DMSO溶解,先去显微镜下仔细观察下细胞,细胞左右时候有紫色结晶出现,有些细胞的结晶很漂亮哦

发自小木虫Android客户端
6楼2016-09-13 20:05:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by yyy0305 at 2016-09-13 20:05:16
MTT的浓度是否合适,浓度太小反应不会明显,MTT反应完建议你别急着用DMSO溶解,先去显微镜下仔细观察下细胞,细胞左右时候有紫色结晶出现,有些细胞的结晶很漂亮哦
...

如图,细胞MTT结晶图。不是每个细胞都这样清晰的轮廓,但是会有紫色结晶,一团一团的
MTT毒性实验,OD值太小


MTT毒性实验,OD值太小-1



发自小木虫Android客户端
7楼2016-09-13 20:23:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

幸福花儿开

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 51mimi at 2016-07-03 12:06:50
|首先你要了解你的药物作用浓度和作用时间,再来做M T T的时候要留意培养基不加血清,原来有血清的要换液

你好,请问配制药物溶液是用不含FBS的培养液吗?要是不加FBS的话细胞怎么生长啊?

发自小木虫IOS客户端
8楼2018-07-12 23:58:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bubu_0123 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +28 医学老男孩 2026-08-13 60/3000 2026-08-15 19:54 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +7 Ldrop2023 2026-08-13 7/350 2026-08-15 15:57 by mzhh2000
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 22/1100 2026-08-14 23:45 by Noways
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见