10楼: Originally posted by chlorella409 at 2016-06-30 09:55:43
没看到你FT的样品，会不会本身挂柱效果就不好，还有A buffer可以试试把咪唑去掉，虽然这样可以去除一部分杂蛋白，但是也会影响目的蛋白结合柱子，4楼说的线性洗脱也可以试试，还有Ph是7的话应该用Tris-HCl缓冲吧，乙 ...

3楼: Originally posted by hc-material at 2016-06-27 11:04:50
缓冲液PH是多少了。目前的过程没什么大问题。上样完后，用A液要淋洗，目的是把没结合的蛋白冲出柱子，彻底淋洗，然后拉咪唑梯度洗脱。梯度慢些

9楼: Originally posted by biosci at 2016-06-29 21:07:24
没挂柱子

5楼: Originally posted by milamiya at 2016-06-29 14:36:43
buffer A不加咪唑试试，还有就是把pH值适当调高一点。

15楼: Originally posted by xu5606587 at 2016-07-04 16:13:20
醋酸缓冲液调到7 ，不在缓冲范围了吧？流出液pH测定下看看，可以尝试其他缓冲体系。
另外就是他们说的上样平衡液不加咪唑

18楼: Originally posted by 一只毛毛虫 at 2016-07-06 10:49:48
我的目的蛋白在pH8以上就会失活了。听说tris会降低结合效率，是吗？
...

19楼: Originally posted by xuweitao at 2016-07-06 19:01:41
那你就不要超过pH8啦，tris降低效率我反正没遇到过。可以用磷酸盐缓冲啊。...