| 查看: 1135 | 回复: 9 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
关于DNA连金实验操作 已有1人参与
|
||
|
各位，虫友，最近花了近50几天，用DNA连金一直出问题老连不上。所以想咨询各位虫友意见！ 我目标是在金表面连上一个双链DNA，其中一条一端连金，另一条在远离金一端标记荧光基团，所以如果连上就有荧光 我的实验步骤：首先将50uL 10uMDNA用5uL 10mMTCEP活化2小时，然后将其和1mL金胶一同加入NaOH处理过的玻璃瓶中，然后在避光的条件下在摇床上摇晃16h，温度37℃，然后，向反应瓶中加入0.1M PB、0.1%SDS使其浓度达到0.01M PB、0.01%SDS。然后，隔2h逐滴加入2M NaCl溶液时玻璃瓶中NaCl浓度达到0.05M，然后，每隔6-8h滴加2M NaCl溶液，使NaCl浓度达到0.1M、0.2M、0.3M. 然后在8500转（离心力在5500g）下离心25min，然后用0.3M NaCl的0.01M PB进行洗涤，重复三次，最后用1ml 0.3M NaCl的0.01M PBS进行溶解，然后和目标链在70度下保持10min中，然后缓慢将至室温，然后静置12h。最后8500转（离心力在5500g）下离心25min，最后用1ml 0.3M NaCl的0.01M PBS进行溶解。然后用荧光测定，发现荧光量很小。所以，几乎链接DNA很少。 求问：这问题出在哪里？@崇明先生@jiagle |
回复此楼» 猜你喜欢
26届博士申请
已经有4人回复
-
PLLA 微球在生物医学领域的研究与应用
已经有1人回复
-
有机高分子材料论文润色/翻译怎么收费?
已经有84人回复
-
PLLA 微球的材料特性与制备工艺解析
已经有0人回复
-
医用聚己内酯（PCL）全解析：从两段式降解到组织工程应用
已经有0人回复
-
反相硅胶如何再生？
已经有1人回复
-
哈尔滨理工大学2026年研究生调剂，材料科学与化学工程学院研究生调剂
已经有4人回复
-
武汉一本高校招收材料、化学、高分子、纺织、生物相关专业硕士生
已经有0人回复
-
西南交通大学医学院招收生物医学工程和材料与化工专业硕士研究生
已经有15人回复
-
研究生招生
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 【分享】蛋白质纯化个人总结2
已经有38人回复
3楼2016-06-23 18:33:53
2楼2016-06-23 15:21:58
4楼2016-06-24 19:21:31
更深的蓝
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 74 (初中生)
- 金币: 5254.5
- 散金: 109
- 红花: 12
- 帖子: 897
- 在线: 721.6小时
- 虫号: 522920
- 注册: 2008-03-12
- 性别: GG
- 专业: 生化分析及生物传感
5楼2016-06-26 11:42:12
