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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 新到引物，未离心直接开盖有什么补救措施？
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xing33

铜虫 (初入文坛)

[求助] 新到引物，未离心直接开盖有什么补救措施？

实验新手，在生工订了引物，新到的，没有离心直接开盖了，发现里面没东西，赶紧网上查了才知道要先离心再开盖加水。

据说直接开盖干粉会丢失，那我现在直接开盖了有什么补救措施吗？共4管，我只开了其中1管（但我现在不记得开的哪一管了，有什么方法能检测出来是哪一管？稀释后跑胶还是直接测吸光度？）如果检测不出来那只能全部重新再订了。

求助！先谢谢各位了！
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1楼 2016-06-22 10:03:15
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

Eternity宇

禁虫 (著名写手)
★
感谢参与，应助指数 +1
xing33: 金币+1, ★★★很有帮助 2016-06-29 17:30:16
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8楼2016-06-23 11:14:08
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天机哥哥

禁虫 (小有名气)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 应助指数+1 2016-06-23 06:23:15
xing33: 金币+1, ★★★很有帮助 2016-06-29 17:30:36
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2楼2016-06-22 20:22:11
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安静de执着14

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 应助指数+1 2016-06-23 06:23:22
xing33: 金币+1, ★★★很有帮助 2016-06-29 17:30:59
其实应该影响不大，你现在离心后加水稀释，然后可以测定一下引物浓度，或者直接电泳，如果有条带，应该对PCR没影响。
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3楼2016-06-22 22:03:56
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mumu_w2015

新虫 (初入文坛)
问题不大，照常稀释使用。

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4楼2016-06-23 05:05:41
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xu_hai

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎积极回帖 2016-06-26 06:46:27
xing33: 金币+1, ★★★很有帮助 2016-06-29 17:31:19
你仔细看离心管下面是不是有一小白点，很微小，。如果你只是打开盖子，没多大影响

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10楼2016-06-23 12:17:27
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raopian

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎积极回帖 2016-06-26 06:46:34
xing33: 金币+1, ★★★很有帮助 2016-06-29 17:31:27
如果动作不大的话影响是不大的，，你现在随便溶一管做个PCR就好了~~~做不成换一管不就好了，一般只要你没使大力气动问题不大
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11楼2016-06-24 10:09:47
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我爱chi辣椒

木虫 (正式写手)
除了做定量，我是没有离心过，没有多大的影响，go ahead！

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A right way maybe not a good way！
12楼2016-06-24 10:38:17
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Isaac Li

禁虫 (著名写手)
★ ★
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎积极回帖 2016-06-26 06:46:47
xing33: 金币+1, ★★★很有帮助 2016-06-29 17:31:39
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14楼2016-06-24 10:57:39
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天机哥哥

禁虫 (小有名气)
★ ★
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎积极回帖 2016-06-26 06:46:13
xing33: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢~ 2016-06-29 17:35:39
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7楼2016-06-23 10:00:00
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-字仲康

禁虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎积极回帖 2016-06-26 06:47:00
xing33: 金币+6, ★★★★★最佳答案, 谢谢你！ 2016-06-29 17:26:53
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9楼2016-06-23 11:43:14
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werq63

金虫 (著名写手)
可以用机器测一下浓度

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16楼2016-06-25 18:18:39
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werq63

金虫 (著名写手)
看看差异是不是太大

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17楼2016-06-25 18:19:29
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有梦就去追a

新虫 (小有名气)
影响不大，先离心稀释，做pcr看一下，应该没问题

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18楼2016-06-25 23:38:41
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18716248350

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
xing33: 金币+1, ★★★很有帮助 2016-06-29 17:32:43
没什么问题，损失不了好多，引物浓度差一点点没关系，以前我师姐做稀释成了20uM,后来我做，看别人用的10um也做出来了
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19楼2016-06-26 22:40:30
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江边鸟

银虫 (小有名气)
没问题的 我们3.2p的引物照样扩

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21楼2016-06-27 22:34:32
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普通回帖

xing33

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 天机哥哥 at 2016-06-22 20:22:11
没多大关系吧，只要你没有开盖后剧烈摇动，一般不会丢失太多，就算丢失了一点，可能引物浓度有所下降点吧

引物浓度下降对之后PCR有影响吗？
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5楼2016-06-23 09:53:10
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xing33

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 安静de执着14 at 2016-06-22 22:03:56
其实应该影响不大，你现在离心后加水稀释，然后可以测定一下引物浓度，或者直接电泳，如果有条带，应该对PCR没影响。

请问怎么测引物浓度呢？
直接电泳的话是用琼脂糖凝胶就可以了？只需看有无条带，不用看亮度吗？
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6楼2016-06-23 09:55:55
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