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关于磷酸三脂酶(有机磷水解酶)表达纯化的问题
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本人想表达纯化PTE(OPH)之后进行突变,但表达纯化阶段就出现问题。 公司合成基因,按照文献里的方式连接到PET-28a质粒上,表达后包涵体很多,纯化出的酶很少。同时也尝试了其他几种PET载体,而且优化了诱导条件,发现没有明显的提高?求助各位做过这方面实验的高手还有什么方式?更换其他载体么? |
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