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质粒重组挑取的单克隆出现各种不同质粒，求解？ 已有8人参与
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连接时设置无目的片段两个对照（载体加酶&载体无酶），转化后均无菌落，而实验组出现很多菌落。单菌落酶切验证，like this。各位有出现过这种情况吗？是什么原因？（最后一条带是载体大小） 单菌落验证.jpg |
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atlanticwi
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1) 这种东西没有什么可讨论的，目的片段再纯（切胶回收）的片段，连上载体后用通用引物鉴定都能鉴定出一大堆乱七八糟的插入的。你能说清这些是什么东西吗？ 2) 以我当年某师弟的实验作风，不带手套的做实验，做出来的插入片段经测序是人手上某蛋白的编码基因（我们是做植物的），所以纠结这种事没有任何意义，你所确保的是，单克隆里有你的正确片段就行。 |
2楼2016-06-20 20:26:06
闲来小译
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3楼2016-06-21 03:26:25
lizi7952
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连接之前的酶切可能有问题吧，切的乱七八糟的，但又能连起来，之前也有这样的情况，送一堆去测序，都没好的。个人看法。 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2016-06-21 06:50:33
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5楼2016-06-21 07:51:27
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7楼2016-06-21 23:43:12
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