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shigm1121

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒提取

各位亲友:我在做转基因,构建好的表达载体,导入到DH5α扩大培养,菌液PCR有目标条带,在Kan环境下可以生长,但是为什么提取不到质粒。
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shigm1121

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by raopian at 2016-06-21 20:23:37
存在一种情况是,有污染,菌液PCR有产物,但是摇菌浓度浅甚至摇不出来~~提质粒当然摇不出来~~你做菌液PCR的时候最好做一个阴性对照亲,有的时候水都能P出来~~~排除你的引物,酶,缓冲液,等一切试剂都没有污染~ ...

谢谢了
7楼2016-07-10 11:28:52
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ssswzf

金虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
实验操作没有问题的话,看看是不是试剂盒有问题,看看碱裂解液的ph怎么样,悬浮液中RNA酶是否失效
2楼2016-06-20 08:55:08
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sangtian

新虫 (初入文坛)

看看是不是提质粒过程中出现的问题,用的试剂盒还是自己配置的溶液I,溶液II

发自小木虫Android客户端
3楼2016-06-20 09:24:33
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yvonne9044

新虫 (正式写手)

做个对照 看能不能提出来,提不出来就是试剂盒或者溶液的问题,菌液摇的混浊点~

发自小木虫Android客户端
4楼2016-06-20 10:00:20
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