应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 质粒提取
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
101/1返回列表
查看: 1397  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

shigm1121

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒提取

各位亲友：我在做转基因，构建好的表达载体，导入到DH5α扩大培养，菌液PCR有目标条带，在Kan环境下可以生长，但是为什么提取不到质粒。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-06-20 08:09:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ssswzf

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
实验操作没有问题的话，看看是不是试剂盒有问题，看看碱裂解液的ph怎么样，悬浮液中RNA酶是否失效
赞一下 回复此楼
2楼2016-06-20 08:55:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sangtian

新虫 (初入文坛)
看看是不是提质粒过程中出现的问题，用的试剂盒还是自己配置的溶液I，溶液II

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-06-20 09:24:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yvonne9044

新虫 (正式写手)
做个对照 看能不能提出来，提不出来就是试剂盒或者溶液的问题，菌液摇的混浊点～

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2016-06-20 10:00:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

raopian

新虫 (初入文坛)
存在一种情况是，有污染，菌液PCR有产物，但是摇菌浓度浅甚至摇不出来~~提质粒当然摇不出来~~你做菌液PCR的时候最好做一个阴性对照亲，有的时候水都能P出来～～～排除你的引物，酶，缓冲液，等一切试剂都没有污染～～～
赞一下 回复此楼
5楼2016-06-21 20:23:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shigm1121

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sangtian at 2016-06-20 09:24:33
看看是不是提质粒过程中出现的问题，用的试剂盒还是自己配置的溶液I，溶液II

用的试剂盒
回复此楼
6楼2016-07-10 11:27:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shigm1121

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by raopian at 2016-06-21 20:23:37
存在一种情况是，有污染，菌液PCR有产物，但是摇菌浓度浅甚至摇不出来~~提质粒当然摇不出来~~你做菌液PCR的时候最好做一个阴性对照亲，有的时候水都能P出来～～～排除你的引物，酶，缓冲液，等一切试剂都没有污染～ ...

谢谢了
回复此楼
7楼2016-07-10 11:28:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

summer994

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

菌液PCR有目标条带，在Kan环境下可以生长，证明质粒存在，卡那下可以生长，说明含该抗性质粒的菌大量存在，同时出现你说的两个条件，我认为菌液没有问题的可能性最大。出问题应该在质粒提取环节，你好好检查一下
赞一下 回复此楼
8楼2016-07-12 17:05:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MMCCBB

新虫 (著名写手)
你可以换培养基试试

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
9楼2016-07-20 20:54:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pangadmire

铁虫 (小有名气)
摇菌摇浑再提试试

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2016-07-24 01:00:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 shigm1121 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-04-02 5/250 2026-04-02 22:54 by pphmily
[考研] 324求调剂 +11 想上学求调 2026-04-02 11/550 2026-04-02 21:23 by 帕尔马拉特
[考研] 321求调剂 +12 y-yh 2026-04-01 14/700 2026-04-02 19:34 by 帕尔马拉特
[考研] 0710生物学求调剂 +9 manman511 2026-04-01 9/450 2026-04-02 10:00 by zxl830724
[考研] 土木304求调剂 +6 兔突突突， 2026-03-31 7/350 2026-04-02 09:06 by coolminer
[考研] 285求调剂 +11 AZMK 2026-04-01 11/550 2026-04-01 22:40 by peike
[考研] 安全工程 285 求调剂 +3 Xinyu56 2026-04-01 4/200 2026-04-01 21:50 by 静静静静静静静�
[考研] 材料专硕调剂 +17 椰椰。 2026-03-29 17/850 2026-04-01 20:44 by cq2548
[考研] 085600 一志愿9 总分351 求调剂学校 +7 czhcz 2026-03-31 9/450 2026-04-01 19:24 by 无际的草原
[考研] 353求调剂 +4 拉钩不许变 2026-04-01 4/200 2026-04-01 18:10 by 记事本2026
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-30 16/800 2026-04-01 17:58 by 邱gl
[考研] 一志愿北京科技大学085601材料工程英一数二初试总分335求调剂 +5 双马尾痞老板2 2026-03-31 5/250 2026-04-01 09:04 by oooqiao
[考研] 335求调剂 +3 321* 2026-03-31 4/200 2026-04-01 00:00 by 321*
[考研] 334求调剂 +7 Trying] 2026-03-31 7/350 2026-03-31 12:33 by 无际的草原
[考研] 274求调剂 +6 xiao爱同学 2026-03-30 6/300 2026-03-31 10:04 by cal0306
[考研] 08工科求调剂286 +5 tgs_001 2026-03-28 5/250 2026-03-31 08:18 by 一只好果子?
[考研] 调剂 +4 GK72 2026-03-30 4/200 2026-03-30 20:32 by dick_runner
[考研] 0703化学321分求调剂 +10 三dd. 2026-03-30 11/550 2026-03-30 19:24 by markhwc
[考研] 293求调剂 +3 末未mm 2026-03-30 5/250 2026-03-30 17:23 by 王保杰33
[考研] 085602 化学工程专硕 340分求调剂 +4 qianbai11 2026-03-29 4/200 2026-03-30 11:34 by 唐沐儿
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭