应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 蛋白就是搞不出来！急，关键！
81/1返回列表
查看: 1346  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

[求助] 蛋白就是搞不出来！急，关键！ 已有2人参与

包涵体蛋白。
透析之前检测有条带，透析之后检测有条带，过柱子之后检测无条带，证明蛋白已经挂在了GST柱子上。
用elution buf+谷胱甘肽 洗脱，检测，什么都没有？？？？？没洗掉？浓度低？
往后想做western，蛋白搞不出来，好急啊
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-06-19 22:09:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxy_0808

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 应助指数+1 2016-06-21 15:26:31
洗脱后检测不到，没有洗脱下来可能性更大，调整梯度洗脱试试。
赞一下 回复此楼
2楼2016-06-21 09:02:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wxy_0808 at 2016-06-21 09:02:12
洗脱后检测不到，没有洗脱下来可能性更大，调整梯度洗脱试试。

意思就是我把谷胱甘肽的浓度加大了？我现在用的是10mM，最多可以用多少的呢？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-06-21 12:54:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

xn8008: 应助指数+1 2016-06-21 15:26:36
直接先把柱子煮了直接上胶
先证明柱子上有蛋白，在证明是洗脱液的事
赞一下 回复此楼
Let God do with it as He wills
4楼2016-06-21 14:43:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

star013

新虫 (知名作家)
我们可以帮您分离纯化

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-06-21 17:18:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-23 06:51:12
本帖仅楼主可见
赞一下
6楼2016-06-22 16:59:27
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 再点一根烟 at 2016-06-22 16:59:27
你不用percission protease 切GST标签的么？我现在也在用GST纯化，取的上清，挂柱后用percission protease过夜切，然后用300mM NaCl 洗脱，得率还可以。

现在只想先把他纯化出来，切的话再说。
就是一直纯不出来

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-06-22 17:11:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MeiPD

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by star013 at 2016-06-21 17:18:31
我们可以帮您分离纯化

你好，你们可以做蛋白纯化吗？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2017-12-18 19:05:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 凯伦爱佳佳 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +10 archvillain 2026-08-02 12/600 2026-08-02 18:46 by hitlend
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 4/200 2026-08-02 18:41 by ca3DVAx4OB19
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 8/400 2026-08-02 18:32 by ca3DVAx4OB19
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 9/450 2026-08-02 18:27 by ca3DVAx4OB19
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 8/400 2026-08-02 18:24 by ca3DVAx4OB19
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 9/450 2026-08-02 18:23 by ca3DVAx4OB19
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 AS6fX1tr1on4 2026-08-02 13/650 2026-08-02 18:14 by ca3DVAx4OB19
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 16/800 2026-08-02 18:12 by ca3DVAx4OB19
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 14/700 2026-08-02 18:11 by ca3DVAx4OB19
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 9/450 2026-08-02 16:32 by jHcrHMhbKCFV
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 15/750 2026-08-02 16:23 by jHcrHMhbKCFV
[基金申请] 面上再次挂了，太难了，躺也躺不了，倦也卷不过，小学校之殇！ +18 低垂的野花 2026-07-31 24/1200 2026-08-02 16:03 by swallowwh
[找工作] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 12/600 2026-08-02 13:43 by jHcrHMhbKCFV
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 cBGhfJFuNMca 2026-08-02 16/800 2026-08-02 13:34 by jHcrHMhbKCFV
[基金申请] 2026年国自然面上资助率 +15 布布和一二 2026-07-30 21/1050 2026-08-02 10:56 by iaeyuan
[教师之家] 基础研究怎么拉横向，学校到款任务越来越多，难以完成 拉横向，都有哪些途径啊 +8 锦衣卫寒战 2026-07-28 10/500 2026-08-02 10:00 by 锦衣卫寒战
[考博] 2027年申博 50+3 射雕英雄胜 2026-07-30 3/150 2026-08-02 09:36 by lfy8008
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备？ 50+3 kf2781974 2026-07-31 7/350 2026-08-02 07:59 by 88817753
[基金申请] 系统今天又提示维护了，估计离放榜不远了 +11 winnerche 2026-07-29 15/750 2026-07-30 23:08 by jnhyjjm
[基金申请] 这种情况还有戏吗 +5 drbart 2026-07-27 11/550 2026-07-29 05:50 by drbart
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭