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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR的问题，有大哥大姐知道的么
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喜自然果冻

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR的问题，有大哥大姐知道的么 已有3人参与

PCR中10ul体系能 P出来，但是变成50ul体系就P不出来了，有谁知道原因的么，我们换另一个pcr仪做50ul的能P出来，初步确定是pcr仪的问题，是不是控温的问题啊，谁来帮帮我！！
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1楼 2016-06-15 16:49:38
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kaobo2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 分子 生物版块鼓励您发帖积极交流，myprayer祝您科研顺利，文章多多。 2016-06-15 22:21:09
xn8008: 应助指数+1 2016-06-20 08:01:48
是PCR仪的问题。我也遇到这楼主这样的情况。体系大，温控不到位，对于容易P出条带的，没有问题，但是有些比较难 P条带，就要减少反应体积。
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2楼2016-06-15 19:30:49
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喜自然果冻

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kaobo2012 at 2016-06-15 19:30:49
是PCR仪的问题。我也遇到这楼主这样的情况。体系大，温控不到位，对于容易P出条带的，没有问题，但是有些比较难 P条带，就要减少反应体积。

我的体系是50的，不能改，我能不能跑50ul但是pcr仪设置成10ul这样来跑？
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3楼2016-06-16 08:34:55
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diy患者

铁虫 (正式写手)
居然还有10ul体系啊，容易蒸发啊，就算加了石蜡油 ，我发现也会体积减少。
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4楼2016-06-16 10:31:01
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tdwinner

木虫 (正式写手)
干脆配好分装成五管 PCR
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5楼2016-06-17 09:01:31
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wangwnehu

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-20 07:38:58
xn8008: 应助指数+1 2016-06-20 08:01:54
PCR仪上都有控温模式的，有Tube和Block模式的，Block模式是对于大体积的，Tube模式是对于10ul以下的模板
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6楼2016-06-18 17:57:33
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masterboyama

铁虫 (著名写手)
能扩出来的你多扩上几管，一起胶回收了就行。

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7楼2016-06-19 07:04:47
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504775490

金虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-20 07:39:26
估计是仪器问题，如果需要量大的就可以平行多做几管混合到一起做后续实验，祝好~~
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8楼2016-06-19 09:49:40
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chaperonesy

新虫 (小有名气)
我一般都是20的体系，然后平行做好几管，用来回收

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9楼2016-06-20 00:19:56
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