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喜自然果冻

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR的问题,有大哥大姐知道的么 已有3人参与

PCR中10ul体系能 P出来,但是变成50ul体系就P不出来了,有谁知道原因的么,我们换另一个pcr仪做50ul的能P出来,初步确定是pcr仪的问题,是不是控温的问题啊,谁来帮帮我!!
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kaobo2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 分子 生物版块鼓励您发帖积极交流,myprayer祝您科研顺利,文章多多。 2016-06-15 22:21:09
xn8008: 应助指数+1 2016-06-20 08:01:48
是PCR仪的问题。我也遇到这楼主这样的情况。体系大,温控不到位,对于容易P出条带的,没有问题,但是有些比较难 P条带,就要减少反应体积。
2楼2016-06-15 19:30:49
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喜自然果冻

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kaobo2012 at 2016-06-15 19:30:49
是PCR仪的问题。我也遇到这楼主这样的情况。体系大,温控不到位,对于容易P出条带的,没有问题,但是有些比较难 P条带,就要减少反应体积。

我的体系是50的,不能改,我能不能跑50ul但是pcr仪设置成10ul这样来跑?
3楼2016-06-16 08:34:55
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diy患者

铁虫 (正式写手)

居然还有10ul体系啊,容易蒸发啊,就算加了石蜡油 ,我发现也会体积减少。
4楼2016-06-16 10:31:01
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tdwinner

木虫 (正式写手)

干脆配好分装成五管 PCR
5楼2016-06-17 09:01:31
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wangwnehu

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-20 07:38:58
xn8008: 应助指数+1 2016-06-20 08:01:54
PCR仪上都有控温模式的,有Tube和Block模式的,Block模式是对于大体积的,Tube模式是对于10ul以下的模板
6楼2016-06-18 17:57:33
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masterboyama

铁虫 (著名写手)

能扩出来的你多扩上几管,一起胶回收了就行。

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7楼2016-06-19 07:04:47
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504775490

金虫 (知名作家)

【答案】应助回帖


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-20 07:39:26
估计是仪器问题,如果需要量大的就可以平行多做几管混合到一起做后续实验,祝好~~
8楼2016-06-19 09:49:40
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chaperonesy

新虫 (小有名气)

我一般都是20的体系,然后平行做好几管,用来回收

发自小木虫Android客户端
9楼2016-06-20 00:19:56
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