应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 求教质粒构建后如何做定点突变
51/1返回列表
查看: 4752  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

549088894

新虫 (小有名气)

[交流] 求教质粒构建后如何做定点突变 已有11人参与

大神们，求教质粒构建后如何做定点突变，两个位点之间相差5个bp，想分别对两个位置做单位点突变以及双位点突变，有没有啥好的建议？有看到有天根，全式金，碧云天的定点突变试剂盒，有没有大神有用过的，求分享下经验？有没有哪个试剂盒突变效率好一点的，谢谢

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-06-15 14:57:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

娟恋幸福

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 感谢提出有意义的帖子 2016-06-17 06:58:42
在你要突变的地方设计引物做重叠PCR

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-06-16 22:38:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

liuyuxue

铁杆木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
定点突变的话就设计一对引物做RF克隆，一步就搞定了
赞一下 回复此楼
花落人亡两不知
2楼2016-06-15 15:02:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

549088894

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuyuxue at 2016-06-15 15:02:41
定点突变的话就设计一对引物做RF克隆，一步就搞定了

RF克隆？不需要买试剂盒？这个是不是在pcr产物上突变，在连接转化的？我想直接在质粒上做突变，前期这个连接构建做了好久了，好不容易做成功

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-06-15 15:05:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuyuxue

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-16 17:45:52
引用回帖:
3楼: Originally posted by 549088894 at 2016-06-15 15:05:36
RF克隆？不需要买试剂盒？这个是不是在pcr产物上突变，在连接转化的？我想直接在质粒上做突变，前期这个连接构建做了好久了，好不容易做成功
...

RF克隆不需要连接，用设计的突变引物，载体为模板进行PCR，产物笑话之后转化就OK
赞一下 回复此楼
花落人亡两不知
4楼2016-06-16 07:41:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +8 holy J 2026-03-21 8/400 2026-03-26 15:10 by 852137818
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +5 晨昏线与星海 2026-03-20 5/250 2026-03-26 13:47 by 一直走不要停
[考研] 289求调剂 +16 硕星赴 2026-03-23 16/800 2026-03-26 13:18 by 小小麦片
[考研] 化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211 +4 小鱼爱有机 2026-03-25 4/200 2026-03-26 10:19 by aa331100
[考研] 考研调剂 +6 来好运来来来 2026-03-21 7/350 2026-03-25 22:43 by 418490947
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-23 3/150 2026-03-25 09:42 by 雾散后相遇lc
[考研] 材料调剂 +6 匹克i 2026-03-23 6/300 2026-03-24 21:09 by greychen00
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
[考研] 300求调剂，材料科学英一数二 +5 leaflight 2026-03-24 5/250 2026-03-24 16:25 by laoshidan
[考研] 材料专硕331求调剂 +4 鲜当牛 2026-03-24 4/200 2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
[考研] 材料/农业专业，07/08开头均可，过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪！？！
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 石河子大学（211、双一流）硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 材料与化工085600，总分304，本科有两篇sci参与，求调剂 +4 幸运的酱酱 2026-03-22 5/250 2026-03-22 20:15 by edmund7
[考研] 求调剂一志愿海大，0703化学学硕304分，有大创项目，四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭