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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 请教大神质粒提取的问题
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欧小八

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教大神质粒提取的问题 已有6人参与

请问有谁用过 E.Z.N.A.® Endo-Free Plasmid Mini Kit I质粒提取试剂盒？一般用这个试剂盒提取出来的质粒浓度应该是多少？第一次做这个实验，做了两次浓度都太低了。用20ul的水溶解，OD260只有0.04。接下来本来要做双酶切连接shRNA模板。现在也做不成了。求大神指教。

请教大神质粒提取的问题
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1楼 2016-06-12 13:29:40
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kangaroo0513

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-13 12:48:17
我一般是5-6ml菌液，用35-45ul水洗脱。正常情况下400ng/ul*40ul
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3楼2016-06-12 21:52:29
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Forest666

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
xn8008: 金币+1, 支持有意义回帖 2016-06-12 19:57:51
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-13 12:47:30
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎积极回帖 2016-06-15 10:13:05
收集了多少菌液？有可能是菌液太少了。另外20μl，感觉太少了，洗脱水太少会影响洗脱量的。
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ATGC
2楼2016-06-12 13:45:31
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zjsuiyuan

新虫 (初入文坛)
一般是菌液太少，实在不行，两管菌液提一管质粒

发自小木虫Android客户端
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4楼2016-06-12 22:33:32
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欧小八

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by kangaroo0513 at 2016-06-12 21:52:29
我一般是5-6ml菌液，用35-45ul水洗脱。正常情况下400ng/ul*40ul

我也是5ml菌液提的。大概是洗脱的水用少了
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5楼2016-06-13 10:25:00
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