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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 基因扩增求助
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DY.W

新虫 (小有名气)

[求助] 基因扩增求助 已有5人参与

一个400左右的片段PCR想了各种办法就是P不出来，可是别人的文献里面说能做出来，大神们有什么好的方法吗？

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1楼 2016-06-05 13:25:02
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阿粥333

铜虫 (初入文坛)
引物什么的没有问题吗？

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2楼2016-06-05 14:22:51
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DY.W

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 阿粥333 at 2016-06-05 14:22:51
引物什么的没有问题吗？

引物没问题

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3楼2016-06-05 15:26:45
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DNA爱Dnase

新虫 (著名写手)
1、引物模板2、药品PCR仪有没有问题

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4楼2016-06-05 15:56:38
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DY.W

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by DNA爱Dnase at 2016-06-05 15:56:38
1、引物模板2、药品PCR仪有没有问题

肯定是没有问题，一起做的其他基因都没问题

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5楼2016-06-05 16:20:21
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miega

银虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-06 19:47:12
1.与tm值有关，做几个温度梯度试试  2.引物有问题，重新设计

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6楼2016-06-05 19:11:40
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DY.W

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by miega at 2016-06-05 19:11:40
1.与tm值有关，做几个温度梯度试试  2.引物有问题，重新设计

都试过了，就是不行。。。。

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7楼2016-06-05 20:07:32
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221345

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-06 19:47:37
可以用梯度PCR仪试一下，引物带有酶切位点吗
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8楼2016-06-05 20:46:37
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DY.W

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 221345 at 2016-06-05 20:46:37
可以用梯度PCR仪试一下，引物带有酶切位点吗

没有酶切位点

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9楼2016-06-05 20:57:14
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221345

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-06 19:47:53
引用回帖:
9楼: Originally posted by DY.W at 2016-06-05 20:57:14
没有酶切位点
...

能否保证模版的质量和浓度，如果梯度没有效果，建议重新合成引物，

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10楼2016-06-05 21:04:40
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