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黄启秀

新虫 (正式写手)

哪里的文献 ~  文献中的引物也有可能做不出来~  如果排除各种模板呀,退货温度啊,  酶的问题  就只有考虑引物了~

发自小木虫Android客户端
11楼2016-06-05 22:15:26
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fengjunchen

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果基因来源是原核生物,那么PCR模板会是DNA,那么没有道理P不出来的。
如果基因来源是真核生物,那么PCR模板大概会是cDNA,那么在其他操作都没问题的情况下,P不出来可能是这个基因在RNA中本身丰度过低,这和培养条件和状态可能相关;或者RNA抽提质量不够好,那么表达丰度越低的基因越难P。
12楼2016-06-06 12:47:12
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1135482512

铁杆木虫 (著名写手)

13楼2016-06-06 20:27:23
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ssswzf

金虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与,应助指数 +1
楼主要知道,文献只是参考;
1 首先你确定你做的所有东西和文献里面的用的是一样的吗?如果不是,有差异是很正常的
2 pcr模板本身的GC含量怎么样?用的什么taq?有没有使用过增强剂等等来提高特异性?
国外的文献都不能完全参考的,实际情况具体分析,祝好运!
14楼2016-06-07 09:59:41
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a314919473

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
换个更好的酶
或者使用荧光定量的超混液
小心文献有作假的
有你真好
15楼2016-06-07 13:37:51
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wywei2012

新虫 (初入文坛)

重新设计引物比较靠谱,文献的看看就行了,别太认真

发自小木虫IOS客户端
16楼2016-06-07 13:59:03
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DY.W

新虫 (小有名气)

谢谢大家,今天用了一个过表达植株的cdn扩出来了

发自小木虫Android客户端
17楼2016-06-07 16:32:09
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啦啦啦chen

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
很有可能是设计的引物有问题
18楼2016-06-07 17:20:22
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lzhxhky

铁虫 (小有名气)

能给出基因名称和目标序列以及引物序列吗?

发自小木虫Android客户端
我是大帅哥
19楼2016-06-07 19:44:14
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dcb005

金虫 (著名写手)

估计是模板问题,真不行就合成

发自小木虫Android客户端
★穷则独善其身,达则兼济天下★
20楼2016-06-07 22:33:15
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