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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 琼脂糖凝胶电泳紫外灯下没有条带
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c小蜗牛c

新虫 (初入文坛)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳紫外灯下没有条带 已有4人参与

连接转化接入大肠杆菌摇菌后提质粒，DNA浓度大约100μg/μl，做琼脂糖凝胶电泳的时候眼观可以看到条带，但是紫外灯下没有或者很浅，求大神帮助解释，谢谢谢谢！@biostar2009
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1楼 2016-06-03 15:16:36
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ssswzf

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰·手有余香，谢谢你的理解与支持。祝您科研顺利，文章多多。 2016-06-03 22:58:43
你说的是个什么意思啊？没有跑电泳的时候你还能看到条带？浓度是100ng/ul还是100ug/ul？已紫外下的结果为准！相互学习Q619857031
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2楼2016-06-03 20:30:34
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c小蜗牛c

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ssswzf at 2016-06-03 20:30:34
你说的是个什么意思啊？没有跑电泳的时候你还能看到条带？浓度是100ng/ul还是100ug/ul？已紫外下的结果为准！相互学习Q619857031

不好意思，表述不太清楚，加EB后跑胶可以轻微看到淡红色条带，但是紫外灯下却看不到了，重复三次都是这样，质粒也重提了

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3楼2016-06-04 10:06:26
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原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-04 22:07:51
EB染料可以肉眼看到目的条带么？是不是loading buffer的作用？另外成像仪器的参数是不是没有设置好，比如波长，焦虑，亮度，分辨率等等，当然也不排除你仪器的紫外灯管寿命不行了，祝好！

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天空才是极限，我有信心飞的更高！
4楼2016-06-04 10:36:44
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Cathering_w

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
EB加很多是可以日光下肉眼可见条带，到你的阐述现象确实不正常，上图看下，可以更换机器试试排除问题

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博士终于毕业了，未来还有什么困难能难得倒我呢！加油我得未来。
5楼2016-06-04 12:55:42
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ssswzf

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
引用回帖:
3楼: Originally posted by c小蜗牛c at 2016-06-04 10:06:26
不好意思，表述不太清楚，加EB后跑胶可以轻微看到淡红色条带，但是紫外灯下却看不到了，重复三次都是这样，质粒也重提了
...

提的质粒有问题吧！浓度再低也应该可以检测到的，是不是试剂有问题
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6楼2016-06-05 08:20:46
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yanxx2015

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
7楼2016-06-05 09:27:55
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221345

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
点marker了吗？建议你同样设定状态下看一下别人的胶，能看到的话就不是机器问题，胶的厚度正常吗？跑胶电流电压都正常？
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8楼2016-06-05 21:19:33
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你太善良

新虫 (著名写手)
看到的是buffer指示剂？

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9楼2016-06-05 21:57:41
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黄启秀

新虫 (正式写手)
提完质粒测浓度时质量怎么样～  紫外灯下条带很淡可能是浓度或者质量不太好，另外maker 亮不亮  如果都很淡  可能EB时间长了

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10楼2016-06-05 22:11:52
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