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ttt7788

新虫 (正式写手)

引用回帖:
27楼: Originally posted by xincer at 2016-05-28 20:35:30
楼主你好。你们也是做血浆的游离核酸吗? 能问一下你们的核酸提取试剂盒或者protocol吗?

我DNA  RNA 都做过,你要提取DNA 还是RNA 的pro?

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

31楼2016-05-30 15:39:49
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viki_MDK

银虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by ttt7788 at 2016-05-25 23:32:45
你也觉得下面很强的条带不是二聚体?  而模糊的是?...

M旁边不是有对照吗?还不能说明问题?
32楼2016-05-30 15:40:59
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ttt7788

新虫 (正式写手)

引用回帖:
25楼: Originally posted by armigera at 2016-05-28 14:38:59
最下面模糊的是引物二聚体。没加模板的阴性对照组都有这条带(第二泳道),建议楼主检查所用试剂是否污染~

本人又用其他几种primer测试了一下, 产物长度分别为630, 300 bp。  都会得到最下端的产物。  所有试剂都换新的,移液器也换了新的,不会是污染
33楼2016-05-30 19:10:08
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ttt7788

新虫 (正式写手)

引用回帖:
26楼: Originally posted by 边木殇 at 2016-05-28 14:57:36
我实验的时候也是,产物不足100bp的时候条带很模糊,特别像二聚体。楼上说的好,直接切胶测序,或者做一组不加模板的对照,楼主最好再检查下俩对引物的dimer值是不是有的过高

ladder 旁边的NTC就是不加模板的对照。  用primer blast 查过, primer dimer calculator 算过,没有非特异性产物以及引物二聚体
34楼2016-05-30 19:11:44
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xincer

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送红花一朵
引用回帖:
31楼: Originally posted by ttt7788 at 2016-05-30 15:39:49
我DNA  RNA 都做过,你要提取DNA 还是RNA 的pro?...

RNA的  wangxincer@163.com  非常感谢啦,我提出来的效果都不好。。

发自小木虫Android客户端
35楼2016-05-30 23:36:51
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世外清风

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
切胶测序就可以了。
36楼2016-05-31 01:58:04
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wywei2012

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by ttt7788 at 2016-05-25 23:32:45
你也觉得下面很强的条带不是二聚体?  而模糊的是?...

一定不是引物二聚体

发自小木虫IOS客户端
37楼2016-06-10 11:13:07
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