应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 乳酸菌感受态细胞制备
101/1返回列表
查看: 3172  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Yuanfang_818

金虫 (小有名气)

[求助] 乳酸菌感受态细胞制备 已有2人参与

请教一下，有知道乳酸菌感受态细胞怎么自己做的吗？我做的是乳酸乳球菌，其他的也可以～

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-05-25 12:08:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sh727986091

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Yuanfang_818: 金币+3, ★★★很有帮助 2016-05-28 00:50:46
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2882400&_from=share&u=2336612&h=e0517803

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2016-05-25 12:46:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Yuanfang_818

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sh727986091 at 2016-05-25 12:46:09
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2882400&_from=share&u=2336612&h=e0517803

先谢谢了，好好看看～

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-05-25 13:52:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanglei512

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Yuanfang_818: 金币+2, ★★★很有帮助 2016-05-28 00:51:36
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励热心应助！ 2016-05-28 07:55:33
乳酸菌感受态很好做，基本和大肠做法差不多，主要是洗液不同，网上应该有很多，你需要注意的是乳酸菌要多洗两遍，每次都要弃干净，应为培养液离子很多，洗不干净容易爆杯，还有就是感受态用完不要用上次剩下的感受态划线做感受态，要用最初纯化好的细胞做感受态，如果不这样，乳酸菌感受态细胞会退化，希望可以帮助到你
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2016-05-27 20:36:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

finland

新虫 (小有名气)
我的一点电转化心得就是，细胞浓度要高（很关键），甘氨酸多洗两便（洗掉离子），外源片段浓度也要高。然后点击不击穿就好。总会长出来几个转化子的。
另外乳酸菌很多是厌氧的，如果没有二氧化碳培养条件的话，采用倾倒平板法比涂布法培养更容易获得转化子。

我做实验很粗放的，经常击穿了也能获得转化子，呵呵。可能与质粒片段大小有关吧。  我做的外源质粒是3kb到6kb之间。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2016-05-27 22:06:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Yuanfang_818

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wanglei512 at 2016-05-27 20:36:59
乳酸菌感受态很好做，基本和大肠做法差不多，主要是洗液不同，网上应该有很多，你需要注意的是乳酸菌要多洗两遍，每次都要弃干净，应为培养液离子很多，洗不干净容易爆杯，还有就是感受态用完不要用上次剩下的感受态 ...

谢谢，记下了～

发自小木虫Android客户端
回复此楼
6楼2016-05-27 22:57:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Yuanfang_818

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by finland at 2016-05-27 22:06:59
我的一点电转化心得就是，细胞浓度要高（很关键），甘氨酸多洗两便（洗掉离子），外源片段浓度也要高。然后点击不击穿就好。总会长出来几个转化子的。
另外乳酸菌很多是厌氧的，如果没有二氧化碳培养条件的话，采用 ...

谢谢，我也要做电转，记下了～

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-05-27 22:59:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

finland

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by Yuanfang_818 at 2016-05-27 22:59:50
谢谢，我也要做电转，记下了～
...

甘氨酸洗还有一个作用是降低细胞膜厚度，刚才忘说了。

另外乳球菌转化子筛选争取用红霉素抗性，卡纳可能假阳性会高一点。电击电压也很关键，记得是比大肠杆菌高（膜厚）。2.4kv or 2.2 kv？记不清楚了，可以查文献。
赞一下 回复此楼
8楼2016-05-28 02:06:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

学之理

铁虫 (初入文坛)
楼主，你的乳酸菌感受态细胞做好了嘛？
赞一下 回复此楼
9楼2016-07-26 15:35:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海之骄子79

新虫 (初入文坛)
楼主，可不可以赠送或者交换乳酸乳球菌，非常感谢

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
10楼2017-11-07 19:53:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Yuanfang_818 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-18 6/300 2026-03-22 20:18 by edmund7
[考研] 环境学硕288求调剂 +6 皮皮皮123456 2026-03-22 6/300 2026-03-22 16:52 by i_cooler
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:12 by 朱芷琳
[考研] 生物学一志愿985，分数349求调剂 +4 zxts12 2026-03-21 7/350 2026-03-22 09:57 by zxts12
[考研] 一志愿华中科技大学071000，求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +5 holy J 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:42 by Catalysis25
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 302求调剂 +12 呼呼呼。。。。 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:29 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 华东师范大学-071000生物学-293分-求调剂 +3 研究生何瑶明 2026-03-18 3/150 2026-03-21 01:30 by JourneyLucky
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +22 rare12345 2026-03-18 22/1100 2026-03-20 20:39 by zhukairuo
[考研] 295材料求调剂，一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
[考研] 0856调剂，是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考博] 申博26年 +3 八6八68 2026-03-19 3/150 2026-03-19 19:43 by nxgogo
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +10 慕寒mio 2026-03-16 10/500 2026-03-19 15:26 by 丁丁*
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
[考研] 【同济软件】软件（085405）考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
[考研] 0703化学调剂 +3 妮妮ninicgb 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:29 by macy2011
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭