应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 乳酸菌感受态细胞制备
101/1返回列表
查看: 3412  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Yuanfang_818

金虫 (小有名气)

[求助] 乳酸菌感受态细胞制备 已有2人参与

请教一下，有知道乳酸菌感受态细胞怎么自己做的吗？我做的是乳酸乳球菌，其他的也可以～

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-05-25 12:08:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sh727986091

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Yuanfang_818: 金币+3, ★★★很有帮助 2016-05-28 00:50:46
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2882400&_from=share&u=2336612&h=e0517803

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2016-05-25 12:46:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Yuanfang_818

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sh727986091 at 2016-05-25 12:46:09
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2882400&_from=share&u=2336612&h=e0517803

先谢谢了，好好看看～

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-05-25 13:52:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanglei512

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Yuanfang_818: 金币+2, ★★★很有帮助 2016-05-28 00:51:36
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励热心应助！ 2016-05-28 07:55:33
乳酸菌感受态很好做，基本和大肠做法差不多，主要是洗液不同，网上应该有很多，你需要注意的是乳酸菌要多洗两遍，每次都要弃干净，应为培养液离子很多，洗不干净容易爆杯，还有就是感受态用完不要用上次剩下的感受态划线做感受态，要用最初纯化好的细胞做感受态，如果不这样，乳酸菌感受态细胞会退化，希望可以帮助到你
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2016-05-27 20:36:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

finland

新虫 (小有名气)
我的一点电转化心得就是，细胞浓度要高（很关键），甘氨酸多洗两便（洗掉离子），外源片段浓度也要高。然后点击不击穿就好。总会长出来几个转化子的。
另外乳酸菌很多是厌氧的，如果没有二氧化碳培养条件的话，采用倾倒平板法比涂布法培养更容易获得转化子。

我做实验很粗放的，经常击穿了也能获得转化子，呵呵。可能与质粒片段大小有关吧。  我做的外源质粒是3kb到6kb之间。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2016-05-27 22:06:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Yuanfang_818

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wanglei512 at 2016-05-27 20:36:59
乳酸菌感受态很好做，基本和大肠做法差不多，主要是洗液不同，网上应该有很多，你需要注意的是乳酸菌要多洗两遍，每次都要弃干净，应为培养液离子很多，洗不干净容易爆杯，还有就是感受态用完不要用上次剩下的感受态 ...

谢谢，记下了～

发自小木虫Android客户端
回复此楼
6楼2016-05-27 22:57:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Yuanfang_818

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by finland at 2016-05-27 22:06:59
我的一点电转化心得就是，细胞浓度要高（很关键），甘氨酸多洗两便（洗掉离子），外源片段浓度也要高。然后点击不击穿就好。总会长出来几个转化子的。
另外乳酸菌很多是厌氧的，如果没有二氧化碳培养条件的话，采用 ...

谢谢，我也要做电转，记下了～

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-05-27 22:59:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

finland

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by Yuanfang_818 at 2016-05-27 22:59:50
谢谢，我也要做电转，记下了～
...

甘氨酸洗还有一个作用是降低细胞膜厚度，刚才忘说了。

另外乳球菌转化子筛选争取用红霉素抗性，卡纳可能假阳性会高一点。电击电压也很关键，记得是比大肠杆菌高（膜厚）。2.4kv or 2.2 kv？记不清楚了，可以查文献。
赞一下 回复此楼
8楼2016-05-28 02:06:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

学之理

铁虫 (初入文坛)
楼主，你的乳酸菌感受态细胞做好了嘛？
赞一下 回复此楼
9楼2016-07-26 15:35:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海之骄子79

新虫 (初入文坛)
楼主，可不可以赠送或者交换乳酸乳球菌，非常感谢

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
10楼2017-11-07 19:53:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Yuanfang_818 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] filecode +13 documentary 2026-08-10 15/750 2026-08-12 15:56 by 云上清扬
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭