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darlingbear新虫 (小有名气)
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小分子蛋白(约14kD),需要在跑胶和转膜上注意些什么 已有1人参与
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跑这种小分子蛋白对running buffer或trans buffer有没有什么特殊的要求 发自小木虫Android客户端 |
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沉默、颜泪
木虫 (正式写手)
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电泳能做出来吧?染色后能看到目的条带吗?做WB要注意上样量,上样蛋白最好控制在20——40ug之间,转膜一般用湿转,14KD的蛋白用0.22um的膜、180mA,30分钟即可。全程注意控温,冰水浴转膜。 封闭1——2h,一抗孵育最为关键!一抗的好坏直接影响最终结果。一般4℃孵育过夜,第二天多次清洗,二抗推荐用1:10000倍稀释(影响背景值)。 WB最重要的就是一抗,其他步骤注意一下都挺好规范的。 发自小木虫Android客户端 |
6楼2016-05-29 01:13:53

2楼2016-05-24 12:51:20
darlingbear
新虫 (小有名气)
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- 性别: MM
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3楼2016-05-24 13:11:24

4楼2016-05-24 17:17:32










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darlingbear