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darlingbear新虫 (小有名气)
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小分子蛋白（约14kD）,需要在跑胶和转膜上注意些什么 已有1人参与
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跑这种小分子蛋白对running buffer或trans buffer有没有什么特殊的要求 发自小木虫Android客户端 |
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5楼2016-05-24 17:27:51
2楼2016-05-24 12:51:20
darlingbear
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电泳能做出来吧？染色后能看到目的条带吗？做WB要注意上样量，上样蛋白最好控制在20——40ug之间，转膜一般用湿转，14KD的蛋白用0.22um的膜、180mA，30分钟即可。全程注意控温，冰水浴转膜。 封闭1——2h，一抗孵育最为关键！一抗的好坏直接影响最终结果。一般4℃孵育过夜，第二天多次清洗，二抗推荐用1:10000倍稀释（影响背景值）。 WB最重要的就是一抗，其他步骤注意一下都挺好规范的。 发自小木虫Android客户端 |
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darlingbear6楼2016-05-29 01:13:53
darlingbear
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7楼2016-05-30 09:59:49
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8楼2016-05-30 10:14:07
darlingbear
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