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pissor木虫 (正式写手)
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[求助]
付金币紧急求助：为什么菌落PCR是阳性，但酶切后为空载体大小？
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载体是原核表达载体pet28a,大小为5369bp，目的基因大小为750bp,二者用相同的两个内切酶酶切后，连接，转化大肠杆菌TOP 10，在长出菌落后，随机挑取做菌落PCR，可以扩出和目的基因一样大小的条带，选取可以扩出目的带的菌落（在做菌落PCR时已经做相应的划线培养），提取质粒后，做单酶切后竟然是是空载体的大小，当然了，双酶切也没有切出750bp大小的条带。 请教大虾指点，这是什么原因？如何解决？ 谢谢您的帮助！ |
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