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急需帮助，快毕业了，WB还没做出来！！怎么办 已有13人参与
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摸爬滚打一个多月，从什么不懂做WB，还没做出来，然而快要毕业啦，愁死！！ 现在转膜8V20分钟，转后膜用丽春红染有蛋白质条带，胶考染大分子有一些条带，小分子（95kd以下）是干净的！ 一抗4℃过夜，后洗膜3*10min，二抗孵育1小时，洗膜3*10min 用的ECL发光剂，机器曝光五张图，每次一分钟（同实验室的也这样做，应该没问题，用同学爆出来的ECL试剂试过，也不是ECL的问题） 蛋白应该没问题，同学做WB时让同学帮忙跑了一道，用他们的beta-actin孵育可以看到结果！ 上个星期认为是抗体的原因（老师买的抗体是去年六月份的，快到期了，有可能降解了），希望老师重新买，哪里知道她重新买的国产的beta-actin，推介稀释比例1:3000啊！！昨天重新做了一次，还是没做出来！！ 现在想问有可能是什么原因呢！！挺急的，谢谢大家！！ |
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4楼2016-05-22 09:12:47
2013101102
铜虫 (正式写手)
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2楼2016-05-21 18:09:49
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popo0625
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5楼2016-05-22 09:38:26