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南山五柳生

铁虫 (小有名气)

[求助] 配制一定pH的聚乙二醇能用缓冲液吗

最近在做原生质体融合,用的40%聚乙二醇(PEG6000),加了钙盐促融,pH要求为7,配好之后试剂有些粘稠,不大好调pH,可以用pH为7的磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液作溶剂,不调pH了,可以吗?请高手指点~

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longevens

新虫 (初入文坛)

您好,请问楼楼,我最近也在做原生质体,我的原因是在原生质体离心这一方面,8000转离心3分钟,直接倾倒,然后镜检酶解上清液,发现上清液还是有很多的原生质体。然后再次用0.7NaCl清洗离心,倾倒上清液,然后再镜检就只有一点点原生质体了根本不够做转化,楼楼请问你是怎么处理上清液的呢?我现在都不敢倒了。还有你每次是做多少体系的呢?我是做的10ml得酶解体系;还有为什么我在用STC悬浮的时候溶液会变成乳白色呢(STC溶液是澄清的,配方跟大众一样)?离心完了就成了白色粘稠沉淀,镜检完全看不到原生质体了,感觉被裹住了。非常希望您的帮助。
Bequiet
2楼2017-08-10 17:08:45
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