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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 为什么粗提出来的DNA会这样
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zfy535251

新虫 (小有名气)

[求助] 为什么粗提出来的DNA会这样 已有3人参与

试了好多次了，找不到原因，大家能给分析一下不

为什么粗提出来的DNA会这样


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1楼 2016-05-14 14:52:24
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卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰·手有余香，谢谢你的理解与支持。祝您科研顺利，文章多多。 2016-07-07 19:09:23
降解，都是小片段和RNA，另外上样孔有蛋白残留。
尝试液氮研磨、后期沉淀核酸动作轻柔、回溶后四度或-20保存
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2楼2016-05-14 16:42:09
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1135482512

铁杆木虫 (著名写手)
质量不好

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3楼2016-05-16 15:56:04
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zw0128

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-05-14 16:42:09
降解，都是小片段和RNA，另外上样孔有蛋白残留。
尝试液氮研磨、后期沉淀核酸动作轻柔、回溶后四度或-20保存

DNA不是不容易降解么
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4楼2016-07-07 17:51:58
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醉恋冬风

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by zw0128 at 2016-07-07 17:51:58
DNA不是不容易降解么...

不容易降解不是不会降解，而且本身环境中可能有DNase存在，液氮低温主要就是抑制DNase活性，包括DNA的保存也要在低温中。虽然DNase较容易失活，但是一旦存在消化DNA的效果还是比较明显的。
另外使用液氮时候注意保持温度，不要让温度过高融化，提取过程中反复冻融会对提取的DNA质量造成影响。
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5楼2016-07-07 21:52:49
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梅太奇阿拉干

木虫 (小有名气)
细胞破碎后加入裂解液以后的混匀过程中一定要轻柔，因为dna从细胞里释放出来后蛋白被抽提，稳定dna的结构被破坏，就容易受到机械力的破坏，如果是手提检查提取试剂ph和是否需要灭菌，试剂里也可能含有dna酶，然后就是操作过程要注意所有器具高温灭菌

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6楼2016-07-15 22:13:15
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hqxhss

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

请问你找出原因了吗，解决了吗，我最近也出现了这样的问题，提出来的DNA降解
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7楼2016-09-05 13:53:02
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