| 查看: 3213 | 回复: 17 | |||
矜天木虫 (正式写手)
|
[交流]
什么鬼，切好质粒放冰箱-20°C还会自连？
|
|
最近做了个电转，发现从冰箱拿出来的，切好的质粒转化居然长了好多蓝斑。一个半月前做过差不过一样的实验，当时并没有这种现象。 注： 质粒是从takara买的载体pHSG299。 连接体系用的也是takara的T4连接酶。 碱性磷酸酶用的是takara的BAP。 内切酶用的是Thermo的BamHI。 事情是这样的： 一个半月前，从takara买来了载体pHSG299，打算建库用，所以做了BamHI酶切、去磷酸化等预实验，顺便验了感受态的效率。 当时做的是化转，结果如下。  可以看到感受态OK，各种测试都OK。 然而就这两天，我又拿这些当初保存的质粒出来转化作为对照，情况就开始不对了。 这次做的是电转，结果如下。  这次除了保证了感受态的质量，其他的。。。 我想问各位有见过这样的情况吗？单酶切的质粒放在-20°C，包括做了去磷酸化的，还能够自连？ |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有283人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
kaobo2012
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 100 (初中生)
- 金币: 5426.6
- 散金: 200
- 红花: 15
- 帖子: 731
- 在线: 255.3小时
- 虫号: 1168995
- 注册: 2010-12-13
- 专业: 抗体工程学
2楼2016-05-14 23:20:18
矜天
木虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 10054.1
- 散金: 1114
- 红花: 2
- 帖子: 816
- 在线: 102.2小时
- 虫号: 1228488
- 注册: 2011-03-10
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2016-05-15 00:05:53
匿名
用户注销 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1647.9
- 散金: 2146
- 红花: 1
- 帖子: 646
- 在线: 58.1小时
- 虫号: 0
- 注册: 2016-03-24
- 性别: GG
- 专业: 基础兽医学
4楼2016-05-16 07:18:22
匿名
用户注销 (正式写手)
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 4476.8
- 散金: 33
- 红花: 4
- 帖子: 743
- 在线: 156.8小时
- 虫号: 0
- 注册: 2015-08-31
- 性别: GG
- 专业: 兽医传染病学
5楼2016-05-16 09:43:22
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
矜天: 金币+3 2016-05-17 00:28:40
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
矜天: 金币+3 2016-05-17 00:28:40
|
本帖内容被屏蔽 |
6楼2016-05-16 23:11:35
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
本帖内容被屏蔽 |
7楼2016-05-16 23:13:37
8楼2016-05-17 00:02:49
矜天
木虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 10054.1
- 散金: 1114
- 红花: 2
- 帖子: 816
- 在线: 102.2小时
- 虫号: 1228488
- 注册: 2011-03-10
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
9楼2016-05-17 00:29:57
atlanticwi
金虫 (正式写手)
琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
- MolEPI: 25
- 应助: 138 (高中生)
- 金币: 141.2
- 散金: 350
- 红花: 13
- 帖子: 536
- 在线: 313.2小时
- 虫号: 1099992
- 注册: 2010-09-15
- 专业: 植物生理与生化
10楼2016-05-17 09:46:57