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minedecn

新虫 (初入文坛)

[交流] sds-凝胶电泳跑不出条带的问题

我跑的是顽拗型种子胚轴和子叶中的蛋白,跑完后marker条带很清晰,但是样品没有任何条带,连浓缩胶上也没有,说明没有蛋白。用考马斯亮蓝测了样品中蛋白含量很高。这是什么原因啊?谢谢
[search]sds[/search]

[ Last edited by 350784478 on 2009-11-8 at 15:31 ]
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minedecn

新虫 (初入文坛)

我跑了marker有条带而且很清晰的。

marker能跑出条带说明体系是没有问题的。缓冲液和各种溶液都重配了还是不行。该怎么办啊?急急急
5楼2008-10-31 17:58:41
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zhua666

金虫 (小有名气)

有很多化学物质对Bradford 法测定蛋白有干扰,所以有时考染即使看起来浓度很高,但实际是没有蛋白存在,所以你需要检查你蛋白提取液是否有干扰物质存在,或换用其它测蛋白方法检测一下。
2楼2008-10-30 21:57:53
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minedecn

新虫 (初入文坛)

我把提取液直接加到考马斯亮蓝里,是没有变色的。

说明提取液应该不会影响蛋白含量测定的结果,会不会我的蛋白含量浓度过高了呢
但是我稀释后跑过还是什么条带都没有
3楼2008-10-30 23:43:28
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asbghj

你的sds没有问题的吗?你跑一下别的样品,看看是不是体系出什么问题了。
4楼2008-10-31 09:50:27
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