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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » sds-凝胶电泳跑不出条带的问题
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minedecn

新虫 (初入文坛)

[交流] sds-凝胶电泳跑不出条带的问题

我跑的是顽拗型种子胚轴和子叶中的蛋白，跑完后marker条带很清晰，但是样品没有任何条带，连浓缩胶上也没有，说明没有蛋白。用考马斯亮蓝测了样品中蛋白含量很高。这是什么原因啊？谢谢
[search]sds[/search]

[ Last edited by 350784478 on 2009-11-8 at 15:31 ]
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1楼 2008-10-30 16:50:46
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zhua666

金虫 (小有名气)
有很多化学物质对Bradford 法测定蛋白有干扰，所以有时考染即使看起来浓度很高，但实际是没有蛋白存在，所以你需要检查你蛋白提取液是否有干扰物质存在，或换用其它测蛋白方法检测一下。
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2楼2008-10-30 21:57:53
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minedecn

新虫 (初入文坛)

我把提取液直接加到考马斯亮蓝里，是没有变色的。

说明提取液应该不会影响蛋白含量测定的结果，会不会我的蛋白含量浓度过高了呢
但是我稀释后跑过还是什么条带都没有
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3楼2008-10-30 23:43:28
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asbghj

你的sds没有问题的吗？你跑一下别的样品，看看是不是体系出什么问题了。
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4楼2008-10-31 09:50:27
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minedecn

新虫 (初入文坛)

我跑了marker有条带而且很清晰的。

marker能跑出条带说明体系是没有问题的。缓冲液和各种溶液都重配了还是不行。该怎么办啊？急急急
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5楼2008-10-31 17:58:41
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asbghj

marker本身是有SDS的，你上的样品中的sds是自己配的，如果出现问题，蛋白就跑不下来了。
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6楼2008-11-03 15:10:36
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fm707755

金虫 (小有名气)
上样缓冲液放太久会失效的.
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7楼2008-11-04 11:18:22
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pxmyz

银虫 (小有名气)
可能上样时出现问题，蛋白样品没有进入点样孔，飘了出来。是不是上样缓冲液不行。
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Ican，Ido.
8楼2008-11-04 11:23:43
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minedecn

新虫 (初入文坛)
哦，那我重新配我的sds看看是不是这个东东的问题。感谢
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9楼2008-11-06 18:58:56
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