24小时热门版块排行榜    

查看: 850  |  回复: 8
当前主题已经存档。

minedecn

新虫 (初入文坛)

[交流] sds-凝胶电泳跑不出条带的问题

我跑的是顽拗型种子胚轴和子叶中的蛋白,跑完后marker条带很清晰,但是样品没有任何条带,连浓缩胶上也没有,说明没有蛋白。用考马斯亮蓝测了样品中蛋白含量很高。这是什么原因啊?谢谢
[search]sds[/search]

[ Last edited by 350784478 on 2009-11-8 at 15:31 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhua666

金虫 (小有名气)

有很多化学物质对Bradford 法测定蛋白有干扰,所以有时考染即使看起来浓度很高,但实际是没有蛋白存在,所以你需要检查你蛋白提取液是否有干扰物质存在,或换用其它测蛋白方法检测一下。
2楼2008-10-30 21:57:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

minedecn

新虫 (初入文坛)

我把提取液直接加到考马斯亮蓝里,是没有变色的。

说明提取液应该不会影响蛋白含量测定的结果,会不会我的蛋白含量浓度过高了呢
但是我稀释后跑过还是什么条带都没有
3楼2008-10-30 23:43:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asbghj

你的sds没有问题的吗?你跑一下别的样品,看看是不是体系出什么问题了。
4楼2008-10-31 09:50:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

minedecn

新虫 (初入文坛)

我跑了marker有条带而且很清晰的。

marker能跑出条带说明体系是没有问题的。缓冲液和各种溶液都重配了还是不行。该怎么办啊?急急急
5楼2008-10-31 17:58:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asbghj

marker本身是有SDS的,你上的样品中的sds是自己配的,如果出现问题,蛋白就跑不下来了。
6楼2008-11-03 15:10:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fm707755

金虫 (小有名气)

上样缓冲液放太久会失效的.
7楼2008-11-04 11:18:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pxmyz

银虫 (小有名气)

可能上样时出现问题,蛋白样品没有进入点样孔,飘了出来。是不是上样缓冲液不行。
Ican,Ido.
8楼2008-11-04 11:23:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

minedecn

新虫 (初入文坛)

哦,那我重新配我的sds看看是不是这个东东的问题。感谢
9楼2008-11-06 18:58:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 minedecn 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见