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弑者星魂

金虫 (正式写手)
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anti-flag m2 affinity gel洗脱问题
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我最近构建了一个带有flag标签的重组载体，并且注射了烟草。初步的western blot结果显示有目的蛋白产生，而且beads也能纯化目的蛋白，但我始终无法用3×flag peptide将目的蛋白洗脱下了，有哪位大神用过这个产品，有什么经验可以分享一下吗，谢谢。（产品是sigma公司的，货号F2426）

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1楼 2016-05-13 09:57:56
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弑者星魂

金虫 (正式写手)
产品全名：EZview Red ANTI-FLAG M2 Affinity Gel

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49楼2016-05-13 10:09:21
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dailywish

木虫 (正式写手)
★
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浓度和洗脱时间对吗 或者是目的蛋白表达量太少 flag pepitite体积过大 一般30—50微升

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84楼2016-05-13 13:20:57
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弑者星魂

金虫 (正式写手)
引用回帖:
84楼: Originally posted by dailywish at 2016-05-13 13:20:57
浓度和洗脱时间对吗 或者是目的蛋白表达量太少 flag pepitite体积过大 一般30—50微升

说明书上说的是100ul，我看洗脱之后的beads上目的蛋白还很多，就加大了洗脱体积

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89楼2016-05-13 13:41:50
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dailywish

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
89楼: Originally posted by 弑者星魂 at 2016-05-13 13:41:50
说明书上说的是100ul，我看洗脱之后的beads上目的蛋白还很多，就加大了洗脱体积
...

你怎么知道目的蛋白很多 你肉眼看到的beads上的东西一般都是没洗干净的脂质

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100楼2016-05-13 15:19:27
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距离的默契2楼
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lxw2023楼
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别重复了4楼
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